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박테리아 형질 전환, DNA 준비, 제한효소를 이용한 DNA 절단 실험 예비 및 결과 보고서2025.01.041. 박테리아 형질 전환 박테리아 형질 전환은 박테리아 세포가 외부 DNA를 흡수하여 새로운 유전적 특성을 획득하는 과정입니다. 이를 통해 박테리아는 항생제 내성, 독소 생산 등의 새로운 기능을 얻을 수 있습니다. 이 실험에서는 박테리아 형질 전환 과정을 수행하고 그 결과를 보고하고 있습니다. 2. DNA 준비 DNA 준비 과정에서는 DNA를 추출, 정제하여 실험에 사용할 수 있는 상태로 만드는 것이 중요합니다. 이를 통해 순수한 DNA를 얻을 수 있으며, 후속 실험에 활용할 수 있습니다. 3. 제한효소를 이용한 DNA 절단 제한효...2025.01.04
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효모 유전자 녹아웃(Gene Knockout) 실험 보고서2025.11.141. 유전자 녹아웃(Gene Knockout) 유전자 녹아웃은 특정 유전자의 기능을 분석하기 위해 그 유전자를 무력화하는 기술입니다. 기능적 단백질에 대한 유전정보를 삭제하는 효소를 이용하여 DNA 단편을 절단하며, 주로 상동 재조합에 의해 진행됩니다. 본 실험에서는 효모의 MET2 유전자를 마커 유전자인 URA3로 치환하여 녹아웃을 수행했습니다. 이 과정을 통해 MET2 유전자가 메티오닌 생합성에 관여함을 확인할 수 있었습니다. 2. 상동 재조합(Homologous Recombination) 상동 재조합은 상동인 두 개의 DNA ...2025.11.14
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포유동물 세포 배양 및 형질전환 결과2025.11.131. 포유동물 세포 배양 포유동물 세포 배양은 생체 외에서 포유동물 세포를 인공적인 환경에서 성장시키는 기술입니다. 적절한 배양 배지, 온도(37°C), 이산화탄소 농도(5%) 등의 조건을 유지하여 세포의 생존과 증식을 촉진합니다. 이는 의약품 개발, 백신 생산, 기초 생명과학 연구 등 다양한 분야에서 필수적인 기술입니다. 2. 형질전환 형질전환은 외부 DNA를 세포 내로 도입하여 세포의 유전적 특성을 변경하는 기술입니다. 포유동물 세포의 경우 전기천공법, 미세주입, 리포펙션 등의 방법이 사용됩니다. 이를 통해 특정 단백질을 발현하...2025.11.13
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서울대 생물학실험 A+ 실험 보고서 32025.05.101. DNA 클로닝과 형질전환 DNA 클로닝은 원하는 DNA 조각을 복제하여 여러 개의 DNA 복사본을 얻는 과정을 의미합니다. 이를 위해 DNA 조각은 벡터라고 불리는 DNA 분자와 재조합되는 과정을 거치며, DNA 조각은 클로닝하고자 하는 유전자나 특정한 염기 서열을 포함하고 있습니다. 일련의 과정 후 복제된 클론은 세포에 삽입되며, 복제 및 유전자 발현에 이용됩니다. 이렇듯 외부 DNA가 도입되며 세포의 유전 형질에 변화가 생기는 경우를 형질 전환이라 일컫는데, 일반적으로 형질 전환에는 plasmid 벡터가 사용됩니다. 2. ...2025.05.10
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DNA 연결 및 형질전환, 플라스미드 추출 및 제한효소 절단2025.11.171. T4 DNA Ligase와 DNA 연결(Ligation) T4 DNA ligase는 T4 박테리오파지에서 유래한 효소로, DNA의 3'-OH와 5'-P 사이에 phosphodiester 결합을 형성하여 DNA를 연결한다. Ligation buffer에는 Tris-HCl(pH 7.6), MgCl2, DTT, ATP가 포함되며, 각각 완충작용, cofactor 제공, 환원환경 조성, cofactor 제공의 역할을 한다. Self-ligation 방지를 위해 double-digestion(서로 다른 제한효소 사용) 또는 alkali...2025.11.17
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대장균 배양과 형질전환, 플라스미드 DNA 분리 및 전기영동2025.11.171. 대장균 배양 및 형질전환 대장균(Escherichia coli)은 유전공학 연구에 가장 널리 사용되는 박테리아로, 약 2μm 길이에 0.8μm 폭의 크기를 가지며 약 460만 개의 염기쌍으로 이루어져 있다. 형질전환은 외부 DNA를 숙주세포 내에 넣어 새로운 유전형질을 얻게 하는 과정이다. 본 실험에서는 Competent cell에 플라스미드 DNA를 도입하기 위해 열 충격 방법을 사용했으며, 45℃에서 1분간 열충격을 주어 세포막을 불안정하게 해 플라스미드가 세포 내로 들어갈 수 있도록 했다. 형질전환된 세포는 항생제 저항성...2025.11.17
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DNA 기술을 이용한 형질전환 및 PCR 실험2025.11.171. DNA 클로닝 및 형질전환(Transformation) DNA 클로닝은 DNA를 재조합하고 숙주 안에서 복제하는 과정이다. 대장균 형질전환을 위해 competent cell을 준비하고 플라스미드를 도입한 후 열충격(heat shock)을 가한다. X-gal/IPTG가 포함된 고체배지에서 배양하면 형질전환된 세포는 흰색 colony를, 형질전환되지 않은 세포는 파란색 colony를 형성한다. 이는 LacZ 유전자의 발현 여부에 따른 결과로, 외부 DNA가 삽입되면 LacZ 발현이 억제되어 β-galactosidase가 생성되지 ...2025.11.17
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플라스미드 추출 및 정제 실험2025.11.171. 알칼리 용해법(Alkaline Lysis Method) 플라스미드 DNA를 분리하는 표준 방법으로, 알칼리 환경에서 대장균의 세포벽과 세포막을 용해시킨 후 산성 용액으로 DNA를 분리한다. 이 방법은 플라스미드 DNA와 염색체 DNA의 크기 및 구조적 차이를 이용하여 선택적으로 플라스미드만 추출할 수 있다. 높은 pH에서 큰 크기의 염색체 DNA는 변성되지만, 작고 supercoiled 구조의 플라스미드 DNA는 중화 과정을 통해 원상태로 복원되는 원리를 활용한다. 2. 플라스미드 DNA의 특성 플라스미드는 대장균 내에서 주로...2025.11.17
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[화학과 수석의 A+ 레포트][조교피드백 포함] 박테리아의 형질전환 (생화학실험)2025.01.161. 형질전환 이번 실험에서는 플라스미드와 박테리아를 이용해 형질 전환한다. 클로닝이란 관심있는 DNA를 많이 만들어내기 위해 박테리아를 이용하는 것을 말한다. 박테리아에 관심있는 DNA 조각을 집어넣고 키우면 관심있는 DNA도 여러개 만들 수 있게 된다. 플라스미드는 박테리아에 DNA를 넣어주기 위한 운반체 역할을 한다. 형질전환 시키는 방법으로는 화학적처리법과 전기천공법이 있으며, 이번 실험에서는 화학적 처리방법으로 CaCl2를 넣어주는 방법을 사용했다. 2. 플라스미드 플라스미드란 세균의 세포 내에 염색체와 별도로 존재하면서 ...2025.01.16
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유전자와 유전체의 유전암호2025.05.101. DNA 유전물질의 특성 DNA는 정보를 저장하고 복제되어 세대 간 전달될 수 있는 유전분자이다. DNA는 세포 내 과정을 조절하고 형질을 결정하며 새로운 변종의 원천이 된다. 2. DNA 구조와 복제 DNA는 두 가닥이 서로 감겨있는 이중나선 구조이며, 4가지 염기(A, T, G, C)로 구성된다. DNA 복제는 반보존적으로 일어나, 부모 가닥이 딸 가닥의 생산을 위한 주형 역할을 한다. 3. 유전자와 단백질의 관계 DNA의 염기서열은 특정 유형의 단백질을 지정한다. 효소는 생화학적 촉매 역할을 하며, 효소 결함은 유전병을 초...2025.05.10
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