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[생화학실험] A+, PCR 및 agarose gel 전기영동 실험2025.01.071. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 원하는 DNA band만을 증폭 가능하며, 이때 DNA polymerase가 사용된다. 30-40 cycle 정도 반복하여 증폭하고자 하는 표적 DNA의 한 DNA 사슬 3'말단에 상보적인 것과 그 반대 사슬의 3'말단에 상보적인 2개의 특정 올리고데옥시뉴클레오티드를 합성하고, 이를 원하는 절편을 함유한 변성된 한 가닥의 표적 DNA와 혼성화 반응 시킨다. DNA polymerase는 Taq DNA polymerase를 사용하며, 이는 열에 안정성이 있는 DNA...2025.01.07
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Ligation and transformation2025.01.141. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기 서열을 인식하고 절단하는 가수분해 효소이다. 제한효소는 박테리아가 박테리오파지 바이러스로부터 자신을 보호하기 위한 수단이다. 제한효소는 다양한 분류 기준에 의해서 Ⅰ형, Ⅱ형, Ⅲ형으로 나뉜다. 제한효소는 유전자 재조합 외에도 유전자 클로닝, 형질전환 등 여러 가지 생명공학 기술에 널리 활용된다. 2. 플라스미드 DNA 플라스미드 DNA는 주형 DNA와 별도로 박테리아에 존재하는 DNA이다. 플라스미드 DNA는 진정세균뿐만 아니라 고세균이나 진핵생물에도 존재한다. 플라스미드 DNA는 독...2025.01.14
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생화학 실험/실습 보고서 (DNA Gel electrophoresis)2025.01.231. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 엔도뉴클레아제로서 재조합 DNA를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소의 종류에는 1형, 2형, 3형, 4형, 5형 등이 있으며, 각각 인식하는 염기서열과 절단 방식이 다르다. 하나의 플라스미드는 여러 제한효소에 의해 자를 수 있다. 2. 전기영동 Agarose gel에서의 DNA pattern은 smear, 용해되지 않은 물질과 고분자량의 DNA, RNA cloud, supercoiled plasmid, relaxed 또는 nicked c...2025.01.23
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아주대학교 A+생명 실험 DNA추출2025.01.121. 플라스미드 DNA 추출 이번 실험에서는 원심분리와 다섯가지의 Buffer를 이용하여 플라스미드 DNA를 추출해냈습니다. 추출한 플라스미드 DNA를 아가로스 겔 전기영동을 통해 확인한 결과, Supercoiled 플라스미드 DNA를 확인할 수 있었습니다. Supercoiled 플라스미드 DNA는 플라스미드 DNA를 분리한 후 가장 흔하게 보이는 구조이며, 크기는 약 2.0kb, DNA Mass는 52ng으로 나타났습니다. 2. 원핵세포와 진핵세포의 차이 원핵세포와 진핵세포는 구조와 구성 요소에 차이가 있기 때문에 유전자를 추출할...2025.01.12
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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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[생화학실험] (A+) Plasmid DNA isolation and characterization by electrophoresis2025.05.031. DNA DNA(Deoxyribo Nucleic Acid)는 뉴클레오타이드의 중합체인 두 개의 긴 가닥이 서로 꼬여있는 이중나선 구조로 되어있는 고분자화합물이다. DNA는 4종류의 뉴클레오타이드가 중합 과정을 통해 연결된 가닥으로 이루어져 있으며, 이 가닥은 Cytosine, Guanine, Adenine, Thymine은 독특한 핵염기(nucleobase)로 구분되기 때문에 흔히 DNA 염기서열이라고 부른다. DNA 염기서열은 유전정보를 나타내는 유전자 구간과 그렇지 않은 비부호화 DNA 구간으로 나눌 수 있다. 2. 재조합 ...2025.05.03
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플라스미드 DNA의 분리 및 정제 방법2025.01.041. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 세균 세포에서 분리할 수 있으며, 일반적인 total cell DNA 분리 방법과 유사하다. 세포를 배양하여 수확하고 세포 추출물을 만든 후, 단백질을 제거하고 에탄올 침전으로 DNA를 농축할 수 있다. 그러나 플라스미드 DNA 분리에는 세균 염색체 DNA와의 분리가 중요한 차이점이다. 플라스미드는 세균 염색체에 비해 크기가 작고 구조적 차이가 있어 이를 이용하여 분리할 수 있다. 2. 플라스미드 미니프레프 방법 플라스미드 DNA를 소량으로 분리하는 대표적인 방법으로는 알칼리 용해법,...2025.01.04
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DNA 결합효소 실험 결과 보고서2025.01.221. DNA 제한효소 실험에서 HindⅢ와 EcoRⅠ 제한효소를 사용하여 Lambda DNA를 절단하였다. 이론적인 digestion 결과와 실제 실험 결과를 비교하였으며, DNA Ladder marker를 이용하여 DNA 크기를 추정하였다. 또한 DNA 밴드의 끌림 현상과 DNA 밴드의 굵기에 대해 고찰하였다. 2. 전기영동 실험 결과를 확인하기 위해 아가로스 겔 전기영동을 수행하였다. 제한효소를 사용하지 않은 경우와 HindⅢ, EcoRⅠ 각각 사용한 경우, 그리고 두 효소를 혼합하여 사용한 경우의 결과를 비교하였다. 전기영동 ...2025.01.22
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아주대학교 생물학실험1 (A+보고서) DNA추출2025.01.101. 원핵세포와 진핵세포의 차이 원핵세포는 DNA가 코일 모양으로 감겨 핵과 핵양체를 이루고 있으며 핵막이 없어 DNA가 세포질로 노출되어 있다. 또한 리보솜의 크기도 진핵세포에 비해 작다. 이러한 이유로 사람 몸에 박테리아가 침입하면 항생제를 먹더라도 우리 몸에 있는 여러 유용 세포들의 단백질 합성에 영향을 주지 못한다. 원핵세포는 편모가 있어 이동이 가능하다는 점에서 진핵세포와 다르지만, 두 세포 모두 원형질 막으로 둘러싸여 있으며 DNA형태의 염색체를 갖는다는 공통점이 있다. 2. 플라스미드 DNA 박테리아 같은 원핵생물들은 ...2025.01.10
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[A+] 서강대학교 일반생물학실험1 실험 11. Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동 풀레포트2025.01.021. DNA 운반체 (Vector) DNA 운반체인 vector는 종류가 다양하며, DNA의 유지와 복제가 가능한 DNA분자이다. 그 중 plasmid는 가장 널리 쓰이는 vector이며, circular구조의 이중가닥 형태를 갖는다. plasmid는 bacteria 또는 몇몇 eukaryotic cell에 존재하는 DNA molecules로 extrachromosomal circular, double stranded의 특징을 갖는다. Chromosomal DNA와는 독립적으로 자가복제가 가능하며 일반적인 bacteria genom...2025.01.02
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