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Plasmid DNA 분리 예비레포트2025.04.261. 플라스미드 DNA 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체이며 DNA에서 물리적으로 분리 돼 있는 대표적인 에피솜 DNA분자입니다. 플라스미드는 유전자 클로닝, 유전자 전달, 외래 유전자 또는 재조합 유전자 발현, 유용 단백질 생산, 백신 상산 등으로 활용될 수 있습니다. 플라스미드 DNA는 염색체 DNA와 달리 작은 환형 DNA이기 때문에 변성 후 회복이 상대적으로 빨리 이루어집니다. 이를 이용하여 플라스미드 DNA를 분리하고 정제할 수 있습니다. 2. 플라스미드 DNA 분리 원리 플라스미드 DNA 분리의 핵심 원리는 변성된 DN...2025.04.26
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박테리아에서 DNA 분리 (생화학 실험)2025.01.161. Alkaline lysis mini prep Alkaline lysis mini prep은 박테리아로부터 플라스미드 DNA를 분리하는 가장 보편적인 방법이다. 이 방법은 세포벽과 세포막을 부수고 DNA만을 분리해낸 후, 크로모좀 DNA와 플라스미드 DNA를 구분하여 순수한 플라스미드 DNA만을 회수하는 것이 핵심이다. 알칼리 조건에서 크로모좀 DNA는 변성되어 침전되지만, 플라스미드 DNA는 supercoiled 상태를 유지하여 회수할 수 있다. 2. 플라스미드 DNA 분리 과정 플라스미드 DNA 분리 과정은 크게 3단계로 이...2025.01.16
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아주대 생물학실험1 결과보고서 [14주차 Plasmid DNA 추출]2025.01.031. 원핵세포와 진핵세포의 유전자 위치 및 특징 차이 원핵세포의 경우 유전체가 한 분자의 원형 DNA로 구성되며, 세포질에 위치한다. 반면 진핵세포의 경우 선형 구조의 DNA가 히스톤 단백질과 결합해 염색체를 구성하고 핵 안에 위치한다. 원핵세포에는 막으로 둘러싸인 세포 소기관이 없으며 세포질에 원형의 작은 DNA인 플라스미드를 갖기도 한다. 진핵세포는 복잡한 막 구조의 세포 소기관을 가지며 플라스미드를 거의 갖지 않는다. 2. 플라스미드 DNA의 물리적 형태 플라스미드 DNA는 Supercoiled DNA, Open-circula...2025.01.03
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아주대학교 생물학실험1 (A+보고서) DNA추출2025.01.101. 원핵세포와 진핵세포의 차이 원핵세포는 DNA가 코일 모양으로 감겨 핵과 핵양체를 이루고 있으며 핵막이 없어 DNA가 세포질로 노출되어 있다. 또한 리보솜의 크기도 진핵세포에 비해 작다. 이러한 이유로 사람 몸에 박테리아가 침입하면 항생제를 먹더라도 우리 몸에 있는 여러 유용 세포들의 단백질 합성에 영향을 주지 못한다. 원핵세포는 편모가 있어 이동이 가능하다는 점에서 진핵세포와 다르지만, 두 세포 모두 원형질 막으로 둘러싸여 있으며 DNA형태의 염색체를 갖는다는 공통점이 있다. 2. 플라스미드 DNA 박테리아 같은 원핵생물들은 ...2025.01.10
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제한효소 절단 및 아가로스 젤 전기영동 실험2025.11.181. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 박테리아와 고세균에서 발견되는 효소로, 외부 DNA를 인식하고 분해하는 보호 메커니즘이다. 각 제한효소는 4~6개의 염기쌍으로 이루어진 특정 서열만 인식하여 절단한다. 예를 들어 EcoR I은 특정 서열에서만 DNA를 절단한다. 제한효소 반응은 적절한 반응조건(염 농도, pH, 온도 등)에서 DNA와 효소를 배양하여 수행되며, 1 Unit는 지정된 완충액과 온도에서 1시간 동안 λ DNA 1㎍을 완전히 분해하는 양을 의미한다. 2. 아가로스 젤 전기영동(Agarose Ge...2025.11.18
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DNA 연결 및 형질전환 실험 예비2025.11.131. DNA Ligation (DNA 연결) DNA 연결은 DNA ligase 효소를 이용하여 두 개의 DNA 분자를 공유결합으로 연결하는 과정입니다. 제한효소로 절단된 DNA의 5' 인산기와 3' 수산기 사이의 포스포디에스터 결합을 형성하여 DNA 분자를 연결합니다. 이 과정은 재조합 DNA 기술에서 벡터와 삽입 DNA를 연결하는 데 필수적인 단계입니다. 2. Transformation (형질전환) 형질전환은 외부에서 도입된 DNA가 세포 내로 들어가 세포의 유전자형을 변화시키는 과정입니다. 박테리아의 경우 화학적 방법이나 전기천...2025.11.13
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DNA 구조의 이해 & DNA 추출2025.05.111. DNA 구조 DNA는 디옥시리보뉴클레오티드로 이루어진 고분자 중합체로, 단일가닥 또는 이중가닥 형태로 존재할 수 있다. 세포를 가진 생물의 DNA는 모두 이중가닥 형태를 가진다. DNA 염기의 구조와 왓슨-클릭 염기쌍의 수소결합 패턴을 이해할 수 있다. 2. 플라스미드 플라스미드는 원핵생물의 염색체 DNA 이외의 자가복제능력을 가지는 DNA환상 분자로, 숙주인 세균에 유전적 다양성을 증가시킬 수 있다. R인자라 불리는 플라스미드는 숙주세포가 항생물질과 독성물질에 저항성을 갖도록 한다. 3. 콜리신 많은 세균균주는 플라스미드에 ...2025.05.11
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제한효소를 이용한 플라스미드 절단 실험2025.11.171. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 서열을 인식하여 절단하는 효소이다. 본 실험에서는 Hind III과 Xbal 두 가지 제한효소를 사용하여 플라스미드를 절단했다. 37℃에서 1시간 반응시켜 플라스미드를 특정 위치에서 절단하는 원리를 이해하고, 절단 반응에서 버퍼, 효소 농도, 반응 시간 등의 조건을 고려하는 것이 중요함을 학습했다. 2. 전기영동(Gel Electrophoresis) DNA 분자를 크기에 따라 분리하는 기법으로, 0.8X agarose gel을 사용하여 절단된 플라스미드를 분석...2025.11.17
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[아주대] 생물학 실험1 - Plasmid DNA 추출2025.05.011. 원핵 세포와 진핵 세포의 차이 원핵 세포는 핵막이 없어 DNA가 세포질에 있으며, 내막계가 발달하지 않아 세포내 소기관이 없다. 진핵 세포는 막으로 둘러싸인 핵을 가지고 있으며 세포내 소기관이 발달되어 있다. 원핵 세포는 주로 원형의 DNA로 이루어진 염색체를 가지고 있으며, 플라스미드라는 작은 원형 DNA를 가지기도 한다. 2. 플라스미드 DNA의 특성 플라스미드는 1 kilo base에서 1 Mega base 크기의 다양한 크기의 환형 DNA로, 자신의 복제기점을 가지고 있어 염색체와 독립적으로 복제된다. 플라스미드는 숙주...2025.05.01
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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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