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아주대 생실1) Plasmid DNA 추출 보고서2025.05.101. 플라스미드 DNA 추출 이 실험을 통해 플라스미드 DNA를 추출하고 전기영동을 통해 플라스미드 DNA의 형태를 관찰할 수 있었습니다. 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체 DNA와 물리적으로 분리되어 있는 대표적인 에피솜 DNA 분자로, E.coli 세균에서 플라스미드를 추출하여 DNA를 관찰했습니다. 실험에서는 여러 가지 버퍼를 사용했는데, 이는 플라스미드 DNA 추출을 위한 것입니다. 실험 결과 3kb와 10kb 부분에서 플라스미드 DNA가 관찰되었으며, 3kb 부분은 Linear DNA, 10kb 부분은 Open-circu...2025.05.10
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연세대(미래) 13주차. DNA분리2025.05.031. DNA 구조 DNA는 인산기, deoxyribose, 4종류의 질소염기로 구성되며, 두 개의 DNA 가닥이 서로 마주보고 있는 상태에서 당-인산-당 골격이 바깥쪽에 위치하고, 두 사슬의 염기들이 수소결합에 의해 쌍을 이루고 있다. A는 항상 T와, G는 항상 C와 쌍을 이루는 상보적인 염기쌍 구조를 가진다. 2. 중심원리 중심원리에 따르면, DNA를 주형으로 하여 RNA를 복사해내는 전사 과정과, 전사된 mRNA가 세포질에서 번역되어 단백질로 전환되는 번역 과정이 있다. 원핵세포의 경우 전사와 번역이 동시에 일어날 수 있다. ...2025.05.03
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DNA에 대한 이해와 ALDH2 추출 및 증폭 실험 _ 과학 연구 소논문 (서울대 학생 첨삭)2025.01.181. DNA 구조와 복제 DNA는 인산, 디옥시리보스, 염기로 구성되는 뉴클레오타이드의 결합체이며, 이중 나선 구조를 갖는다. DNA 복제 과정에서 헬리케이스, 프라이머, DNA 중합효소 등이 관여하여 새로운 DNA 가닥이 합성된다. 2. DNA 추출 DNA 추출을 위해 생체막을 용해하고 단백질을 제거하며, 에탄올 침전 등의 과정을 거쳐 순수한 DNA를 얻을 수 있다. 3. 젤 전기영동 젤 전기영동은 DNA, RNA, 단백질 등의 생체 물질을 분리하는 기술로, 전기장 내에서 물질의 크기에 따라 이동 속도가 다른 것을 이용한다. DN...2025.01.18
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Plasmid DNA mini-preparation and gel electrophoresis2025.01.141. 대장균 대장균은 인간을 비롯한 동물의 대장과 소장에서 발견되는 박테리아의 일종이다. 대장균은 인간에게 해를 끼치지 않으며 오히려 영양분을 소화하고 흡수하는 과정에서 인간에게 도움을 준다. 하지만 경우에 따라 식중독이나 콜레라를 유발하는 병원균으로 작용할 수 있다. 대장균은 산소의 농도나 온도의 변화에 영향을 상대적으로 받지 않으며 다양한 물질로부터 에너지를 얻을 수 있는 능력이 있어 빠르게 번식하고 쉽게 죽지 않는다. 이러한 특징 때문에 대장균은 생명공학이나 유전체 연구에서 자주 사용되는 생물이다. 2. 플라스미드 DNA 추출...2025.01.14
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단백질의 분리2025.01.231. 단백질 분리 실험을 통해 원심분리를 이용하여 세포 내 단백질을 분리하는 방법을 익혔다. 단백질 분리를 위해 세포를 깨고 RIPA 버퍼에 녹인 후 원심분리하여 상층액을 얻었다. 이 상층액에는 세포에서 추출된 단백질이 포함되어 있다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질의 크기에 따라 분리하는 기법으로, 단백질이 SDS에 의해 변성되어 전하/분자량 비율이 동일해지면 전기장 내에서 크기에 따라 이동속도가 달라져 분리된다. 이를 통해 단백질의 분자량을 확인할 수 있다. 3. 세포 용해 세포를 깨는 방법에는 homogeniza...2025.01.23
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대장균에서 재조합 단백질의 생산과 Western blot에 관한 실험2025.01.131. IPTG IPTG는 대장균 lactose operon의 효소합성을 유도하는 강력한 유도물질이다. 보통 유도물질은 operon의 활동에 의해 만들어지는 β-D-galactosidase에 의해 대사 이용하는 것이 많지만, IPTG는 분해되지 않아 비대사성 유도물질이라고도 불린다. 또한, 고농도로 사용시 galactoside permease가 없는 세포에도 투과할 수 있기 때문에 permease가 없는 균주에서의 유도실험에도 사용된다. 2. Buffer condition Tank buffer에는 glycine과 Cl-(Tris-ba...2025.01.13
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DNA 추출2025.04.281. DNA 구조 DNA는 Deoxyribonucleic Acid의 약자로 nucleotide의 중합체인 두개의 긴 가닥이 서로 꼬여 이중나선 구조를 이루고 있는 고분자 화합물이다. DNA의 구조를 살펴보면 한 분자당 polynucleotide 사슬 2개로 구성되어 있으며, 각 가닥은 네가지 종류의 nucleotide로 구성되어 있고, 이 두 가닥은 nucleotide의 염기부위 간 수소결합을 통해 결합한다. 2. DNA 추출 과정 바나나를 소금, 물과 함께 믹서기로 갈아서 걸러주어 세포벽을 파괴하고 DNA가 중성을 띠게 만들어주어...2025.04.28
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구강상피로부터 DNA 추출 실험 보고서2025.05.141. DNA 추출 과정 DNA 추출 과정에서 사용되는 다양한 용액들의 역할에 대해 자세히 설명하고 있습니다. PBS 용액은 세포의 삼투압 변화를 방지하고, GL-buffer는 계면활성제를 포함하여 세포막을 파괴하는 역할을 합니다. Proteinase K와 RNase A는 각각 단백질과 RNA를 분해하여 DNA를 정제하는데 사용됩니다. 이후 Spin column을 이용한 정제 과정에서는 Chaotropic agent와 고농도 염이 DNA를 실리카 막에 흡착시키는 역할을 합니다. 2. PCR 실험 설계 PCR 실험에서 실험군과 대조군을...2025.05.14
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[아주대] 생물학 실험1 - Plasmid DNA 추출2025.05.011. 원핵 세포와 진핵 세포의 차이 원핵 세포는 핵막이 없어 DNA가 세포질에 있으며, 내막계가 발달하지 않아 세포내 소기관이 없다. 진핵 세포는 막으로 둘러싸인 핵을 가지고 있으며 세포내 소기관이 발달되어 있다. 원핵 세포는 주로 원형의 DNA로 이루어진 염색체를 가지고 있으며, 플라스미드라는 작은 원형 DNA를 가지기도 한다. 2. 플라스미드 DNA의 특성 플라스미드는 1 kilo base에서 1 Mega base 크기의 다양한 크기의 환형 DNA로, 자신의 복제기점을 가지고 있어 염색체와 독립적으로 복제된다. 플라스미드는 숙주...2025.05.01
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박테리아에서 DNA 분리 (생화학 실험)2025.01.161. Alkaline lysis mini prep Alkaline lysis mini prep은 박테리아로부터 플라스미드 DNA를 분리하는 가장 보편적인 방법이다. 이 방법은 세포벽과 세포막을 부수고 DNA만을 분리해낸 후, 크로모좀 DNA와 플라스미드 DNA를 구분하여 순수한 플라스미드 DNA만을 회수하는 것이 핵심이다. 알칼리 조건에서 크로모좀 DNA는 변성되어 침전되지만, 플라스미드 DNA는 supercoiled 상태를 유지하여 회수할 수 있다. 2. 플라스미드 DNA 분리 과정 플라스미드 DNA 분리 과정은 크게 3단계로 이...2025.01.16
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