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Lowry-Folin법을 이용한 단백질 정량 (생화학 실험)2025.01.161. 단백질 정량 실험 목적은 Lowry 방법으로 수용액에 녹아 있는 단백질의 양을 정량하는 것입니다. 이를 위해 표준 용액을 이용한 표준 곡선의 작성과 비색정량법을 습득합니다. Lowry 단백질 분석법은 강알칼리 조건에서 구리 이온과 펩타이드 결합의 반응, 그리고 Folin-Ciocalteu 시약과의 반응을 통해 단백질을 정량합니다. 이 방법은 트립토판, 시스테인, 티로신 등의 아미노산과 반응하여 발색되는 원리를 이용합니다. 2. 분광광도법 분광광도법은 물질에 의한 빛의 흡수 현상을 이용하여 화학물질의 양을 정량하는 방법입니다. ...2025.01.16
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PCR을 통한 유전자 증폭 - 예비레포트2025.01.241. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 템플릿, 프라이머, DNA 중합효소, 핵산 구성 물질 등을 이용하여 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭할 수 있습니다. 이 기술은 유전자 분석, 질병 진단, 범죄 수사 등 다양한 분야에서 활용됩니다. 2. DNA 증폭 과정 PCR 과정은 크게 DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성의 3단계로 이루어집니다. DNA 변성 단계에서는 이중 가닥 DNA가 단일 가닥으로 분리되고, 프라이머 결합 단계에서는 프라이머가 상보적인 DNA 서열에...2025.01.24
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DNA 전기영동 예비레포트2025.04.261. 전기영동 전기영동은 전기장 내에서 용액 속의 하전된 물질들이 반대 전하의 전극을 향해 이동해 모양과 크기를 기준으로 분자들을 구분하는 현상을 말한다. 생물학에서 전기영동은 DNA, RNA 및 단백질과 같은 생체고분자물질을 분석, 분리 및 정제하는데 쓰이는 방법 중의 하나이다. 아가로스 젤 전기영동 실험 시 DNA 이동에 영향을 주는 요인으로는 DNA 분자의 크기, 아가로스 젤의 농도, 전압 등이 있다. 2. DNA 구조 및 원리 DNA는 Deoxynucleoride가 중합된 Polynucleotide이며, Polynucleot...2025.04.26
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환원당 측정2025.05.071. 환원당 정량 이번 실험에서는 Somogyi변법을 이용하여 Cu2+의 환원으로 생성된 Cu+이 KIO3와 KI로부터 생성되는 I2를 소비하므로 이때 잔존하는 I2를 Na2S2O3 용액으로 적정하여 환원당의 양을 산출하는 방법을 이해하였다. 실험 결과 sucrose(A시료)의 경우 공시험보다 적정량이 더 많아 환원당 함량이 음수값이 나왔는데, 이는 실험 과정에서 발생한 오차로 인한 것으로 추측된다. 피펫 사용 미숙, 적정점 판단의 기준 부재 등이 원인으로 생각된다. 2. 환원당의 정성 및 정량 방법 환원당의 여부를 확인하는 정성반...2025.05.07
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Crystal Violet Assay 세포생존력검사, 세포독성검사 결과 레포트2025.05.111. Crystal Violet Assay 이번 실험에서는 in vitro 상에서 세포의 독성에 영향을 미치는 약물을 농도에 따라 처리해 세포의 생존력을 확인하고자 한다. Crystal Violet Assay 방법을 통해 농도별 cisplatin 투여시 B16F10 cells의 control 대비 세포 생존력을 확인할 수 있다. 2. 세포독성검사 세포독성 검사는 생체(in vivo)에서 하는 방법과 생체 외(in vitro)에서 하는 방법으로 분류할 수 있다. 생체 외에서는 주로 배양된 세포나 조직을 재료로 하는 경우가 대부분이다....2025.05.11
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단백질 정량 분석: BCA assay2025.01.021. 단백질 정량 분석 BCA assay는 단백질 정량 분석 방법 중 하나로, 단백질 시료에 BCA 시약을 가한 후 흡광도를 측정하여 단백질 농도를 구하는 방법이다. 이 방법은 단백질에 의해 환원된 구리 이온이 BCA와 반응하여 보라색 화합물을 형성하는 원리를 이용한다. 표준 단백질로 BSA를 사용하여 표준곡선을 그린 후, 미지의 단백질 시료의 흡광도를 대입하여 농도를 계산할 수 있다. BCA assay는 단백질의 아미노산 조성에 크게 영향을 받지 않아 비교적 정확한 정량이 가능하다는 장점이 있다. 1. 단백질 정량 분석 단백질 정...2025.01.02
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API kit(3종)를 사용한 미생물 확인시험/동정 진행- 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)/ 살모넬라(Salmonella spp.)/ 리스테리아 모노사이토제네스(Listeria monocytogenes)2025.05.131. 황색포도상구균(Staphylococcus aureus) 황색포도상구균은 그람양성 구균으로, 식중독의 주요 원인균 중 하나이다. API Staph kit를 사용하여 황색포도상구균을 신속하게 동정할 수 있다. 배양 결과 및 보조시약 첨가 후 판독표와 웹사이트 동정 결과를 통해 황색포도상구균으로 확인되었다. 2. 살모넬라(Salmonella spp.) 살모넬라는 그람음성 간균으로, 식중독의 주요 원인균이다. API 20E kit를 사용하여 살모넬라를 신속하게 동정할 수 있다. 배양 결과 및 보조시약 첨가 후 판독표와 웹사이트 동정 ...2025.05.13
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전기영동 예비2025.01.221. 전기영동 전기영동은 생체 고분자들을 분석, 분리하는 방법 중 하나이다. 전기영동은 DNA, RNA나 단백질 등이 전하를 띄고 있고 이들이 전기장에 놓이게 된다면 이동성을 가진다는 것을 기본으로 한다. 전기영동에는 띠 전기영동, 등속 전기영동, 등전점 전기영동, 2D 전기영동 등 다양한 종류가 있다. DNA 이동에 영향을 주는 요인으로는 DNA 크기에 따른 gel 농도, DNA 분자의 크기, 전압 등이 있다. TAE buffer와 EtBr은 전기영동 실험에 중요한 시약이다. 1. 전기영동 전기영동은 생물학, 화학, 의학 등 다양...2025.01.22
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RT-PCR 실험 및 결과 분석2025.05.101. RT-PCR RT-PCR은 RNA를 추출하고 cDNA를 합성하여 PCR로 증폭하는 기술입니다. 이 실험에서는 Labozol을 이용한 RNA 추출, cDNA 합성, GAPDH와 Twist1 유전자의 RT-PCR 증폭을 진행했습니다. RNA 추출 과정에서 chloroform으로 수용성층과 지용성층을 분리하고, isopropanol로 RNA를 침전시켰습니다. 이후 ethanol로 세척하고 DEPC 처리된 물에 재용해하여 RNA 농도와 순도를 확인했습니다. RT-PCR 결과 GAPDH는 일정한 발현을 보였고, Twist1은 chemi...2025.05.10
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[예비] PCR을 이용한 DNA 증폭2025.01.221. PCR 기술 PCR 기술은 DNA의 특정 부분을 증폭하는 기술로, 1983년 Kary Mullis에 의해 개발되었습니다. PCR의 원리는 자연적인 DNA 복제 과정에서 영감을 받았는데, DNA 복제는 세포 내에서 DNA 폴리머레이즈 효소에 의해 이루어지며, 이 효소는 DNA의 주형 가닥을 읽고 상보적인 뉴클레오타이드를 추가하여 새로운 DNA 가닥을 만듭니다. 2. DNA 복제 과정 DNA 복제 과정은 크게 3가지로 진행됩니다. 1) 시작: 복제 기점에서 DNA 이중나선이 풀리고 단일 가닥으로 분리됩니다. 2) 신장: 프라이머가...2025.01.22
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