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형질전환과 블루-화이트 스크리닝 실험2025.11.171. 형질전환(Transformation) 형질전환은 외부의 DNA 또는 플라스미드가 세포에 도입되어 새로운 유전형질을 획득하는 현상입니다. 자연계에서는 세균 성장 곡선의 정체기에 주로 발생하지만, 실험실에서는 화학적 또는 물리적 처리를 통해 수용능 있는 세포(competent cell)를 만들어 효율적으로 형질전환을 수행합니다. 본 실험에서는 CaCl2 처리를 통해 TOP10 E.coli competent cell을 준비하고, heat shock 방식으로 플라스미드 DNA를 세포 내로 도입했습니다. 2. 블루-화이트 스크리닝(Bl...2025.11.17
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DNA 형질전환 실험 결과 및 분석2025.11.141. 형질전환(Transformation) 형질전환은 원래 세포가 가지고 있던 것과 다른 종류의 유전자가 있는 DNA 사슬 조각 또는 플라스미드가 세포들 사이에 침투되어 원래 세포에 존재하던 DNA와 결합하여 세포의 유전형질이 변화되는 분자생물학적 현상이다. 본 실험에서는 재조합된 DNA를 competent cell에 삽입하여 형질전환을 수행하고, ampicillin과 X-gal이 들어 있는 LB plate에서 배양하여 colony를 형성시켰다. 2. 재조합 DNA 선별 방법 클로닝된 DNA 조각이 벡터에 성공적으로 삽입되었는지 확...2025.11.14
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식물분류학 중간과제물2025.01.241. 식물분류형질 식물의 뿌리, 줄기, 잎 등의 특징을 나타내는 영양형질은 종 이하의 분류에 주로 이용됩니다. 뿌리의 형태, 잎의 구조와 모양, 배열 등이 영양형질에 포함됩니다. 영양형질은 같은 종 내에서도 다양하게 나타나므로 종 동정 시 주의가 필요합니다. 2. 뿌리 형태 원뿌리는 곧고 아래로 자라며 양분을 저장하는 반면, 수염뿌리는 원뿌리에서 수염처럼 뻗어나오는 뿌리로 원뿌리가 없기도 합니다. 종자식물에서 발달하는 뿌리는 양치식물 이하에서는 가근이라고 합니다. 1. 식물분류형질 식물분류형질은 식물을 구분하고 분류하는 데 있어 매...2025.01.24
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유전학-박테리아의 증식접합, 형질전환, 형질도입2025.01.171. 자가영양성(Prototrophic) Prototrophic 생물은 일반적으로 최소한의 영양소만으로도 생존하고 번식할 수 있는 박테리아이다. 기본적인 탄소원, 질소원, 염류 등의 기본 영양소만으로 모든 필수적인 유기 분자를 합성할 수 있다. 이러한 생물은 대사 경로가 완전하게 작동하여 추가적인 영양소나 보조 인자를 필요로 하지 않는다. 자연 환경에서 잘 생존하며, 실험실 조건에서도 기본적인 배지에서 잘 자란다. 2. 영양요구성 돌연변이(Auxotrophic) Auxotrophic 생물은 특정 필수 영양소를 합성하지 못하는 돌연변...2025.01.17
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현대생물학실험2: 형질전환, PCR, 전기영동2025.11.171. 형질전환(Transformation)과 Competent Cell 형질전환은 외부 DNA가 세포 내부로 들어와 세포의 형질이 바뀌는 현상이다. Competent cell은 외부 DNA를 받아들일 수 있는 상태의 박테리아 세포로, CaCl2 처리와 열충격을 통해 인위적으로 제조된다. DH5α 대장균을 사용하여 log phase(OD600=0.4~0.6)에서 CaCl2와 glycerol로 처리하면 형질전환 효율이 10^9 CFU/μg에 도달한다. 형질전환 효율은 (CFU on plate/pg DNA) × 10^6 × (total ...2025.11.17
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형질 전환 실험: 원핵 세포의 유전자 조작2025.11.141. 형질 전환(Transformation) 형질 전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포에 삽입하여 새로운 유전형질을 나타내게 하는 과정입니다. 제한효소를 이용하여 plasmid의 특정 부위를 절단하고 원하는 염기서열을 삽입합니다. Competent cell을 CaCl₂로 처리하여 외부 DNA를 쉽게 받아들일 수 있는 상태로 만들고, 42°C heat-shock과 ice bucket 처리를 통해 plasmid를 세포 내로 도입합니다. 이 과정은 인슐린 생산 등 의약품 개발에 광범위하게 활용됩니다. ...2025.11.14
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E.coli 형질전환 실험보고서2025.01.041. 형질전환의 원리 형질전환은 외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는 현상을 말한다. 1928년 영국의 F. 그리피스가 폐렴쌍구균을 이용한 실험을 통해 발견되었다. 형질전환에 필요한 최소 DNA량은 약 10만분의 1 mol이며, double strand DNA가 single strand DNA보다 전환을 일으키기 쉽다. 형질전환 실험을 통해 유전자의 본체가 DNA라는 것이 밝혀졌다. 2. 형질전환의 메커니즘 Competent 세포는 적절한 크기의 DNA 단편과 결합할 수 있다. DNA 흡수에는 에너지가 소...2025.01.04
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전통적인 작물개량법, 분자육종법 그리고 형질전환 방법의 차이점 비교2025.01.251. 전통적인 작물개량법 전통적인 작물개량법은 오랜 역사와 함께 발전해 온 방법으로, 자연 교배와 인위적인 선택 과정을 통해 작물의 유전적 다양성을 확보하고 점진적으로 품종을 개선하는 것이 특징이다. 이 방법은 유전적 다양성 확보와 환경 변화 대응에 장점이 있지만, 시간이 많이 소요되고 예상치 못한 부작용이 발생할 수 있다는 단점이 있다. 2. 분자육종법 분자육종법은 DNA 수준에서 작물의 유전적 특성을 분석하는 방법으로, 유전자 마커와 유전자 지도를 활용하여 원하는 형질을 가진 개체를 빠르게 식별하고 효율적인 개량이 가능하다. 이...2025.01.25
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RNA 준비 및 cDNA 합성: 형질도입 방법론2025.11.141. 형질도입(Transfection) 형질도입은 바이러스의 핵산이나 플라스미드 벡터를 정제하여 진핵세포 내에 도입하는 과정이다. 원핵세포에 도입될 경우는 형질전환(transformation)이라 한다. 세포막의 인지질 이중층은 인산기로 인해 음전하를 띠고 있으며, 핵산도 음전하를 가지고 있어 자발적 도입이 어렵다. 따라서 화학적, 물리적, 생물학적 방법을 이용하여 세포막을 통과시킨다. 2. 화학적 형질도입 방법(Reagent-based Method) 화학적 방법으로는 양이온성 지질(cationic lipids), 인산칼슘(calc...2025.11.14
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박테리아 형질전환 실험 예비 보고서2025.01.031. 플라스미드 플라스미드는 세균의 염색체 이외에 독자적으로 증식할 수 있는 DNA 분자입니다. 플라스미드는 형질전환 실험이나 유전자 공학에서 널리 사용되며, 다양한 종류의 플라스미드가 존재합니다. 2. 유전자 전달 유전자 전달에는 수직적 전달과 수평적 전달이 있습니다. 수직적 전달은 부모 세대로부터 유전형질을 물려받는 것이고, 수평적 전달은 이웃 세균에게 유전자를 전달하거나 받는 것입니다. 3. 박테리아 형질전환 박테리아 형질전환에는 세 가지 과정이 있습니다. 형질전환은 세포가 DNA를 직접 받아들이는 과정, 형질도입은 바이러스에...2025.01.03
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