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생화학 실험/실습 보고서 (완충용액과 산성도)2025.01.231. 완충 용액 제조 이 실험에서는 직접 완충 용액을 제조하고, 이 용액이 실제로 완충의 역할을 하는지 pH 변화를 pH meter로 확인하고자 하였습니다. 완충 용액은 sodium acetate와 acetic acid를 이용하여 제조하였으며, 최종 pH가 4.7이 되도록 조절하였습니다. 2. pH meter 보정 pH meter의 정확한 측정을 위해 pH 7 및 pH 4 표준 용액을 이용하여 pH meter를 보정하는 과정을 거쳤습니다. 이를 통해 pH meter가 정확하게 작동하도록 하였습니다. 3. 완충 작용 확인 제조한 완충...2025.01.23
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[생화학실험] A+, 동물세포 배양 및 세포계수2025.01.031. 효소 반응 및 활성 이 실험에서는 효소인 트립신을 이용하여 우유의 주요 단백질인 카제인을 분해하는 과정을 관찰하였다. 온도에 따른 트립신의 활성을 확인하였는데, 0°C에서는 거의 활성이 없었고 37°C와 65°C에서는 카제인이 분해되어 우유의 투명도가 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이를 통해 효소 반응에 영향을 미치는 요인 중 온도의 중요성을 알 수 있었다. 2. 단백질 분해 효소 이번 실험에서 사용된 트립신은 단백질을 펩티드로 가수분해하는 효소이다. 트립신은 아르기닌, 리신 등의 C말단 펩티드 결합을 절단하는 엔도펩티다아...2025.01.03
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완충용액 제조 및 pH 측정2025.01.031. 산 · 염기의 기본 개념과 pH 실험에서는 산 · 염기의 기본 개념과 pH의 의미를 이해하고자 한다. pH는 수용액 내 수소이온 농도를 나타내는 척도로, 산성과 염기성을 구분하는데 사용된다. 강산과 강염기는 100% 이온화되어 pH 변화가 크지만, 약산과 약염기는 일부만 이온화되어 완충작용을 통해 pH 변화를 완화시킬 수 있다. 2. 완충용액의 사용 이유 생화학 및 생명과학 실험에서는 pH 변화에 민감한 반응이 많이 일어나므로, 완충용액을 사용하여 pH를 일정하게 유지시켜 주는 것이 중요하다. 완충용액은 약산과 그 짝염기, 또...2025.01.03
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박테리아에서 DNA 분리 (생화학 실험)2025.01.161. Alkaline lysis mini prep Alkaline lysis mini prep은 박테리아로부터 플라스미드 DNA를 분리하는 가장 보편적인 방법이다. 이 방법은 세포벽과 세포막을 부수고 DNA만을 분리해낸 후, 크로모좀 DNA와 플라스미드 DNA를 구분하여 순수한 플라스미드 DNA만을 회수하는 것이 핵심이다. 알칼리 조건에서 크로모좀 DNA는 변성되어 침전되지만, 플라스미드 DNA는 supercoiled 상태를 유지하여 회수할 수 있다. 2. 플라스미드 DNA 분리 과정 플라스미드 DNA 분리 과정은 크게 3단계로 이...2025.01.16
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동물세포의 배양(생화학실험)2025.01.161. 세포 배양 세포 배양이란 일반적으로 자연환경 외부의 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정을 말한다. 세포는 살아있는 조직에서 분리된 후에는 신중하게 제어된 조건에서 후속적으로 유지되어야 한다. 이러한 조건은 각 세포 유형에 따라 다르지만 일반적으로 필수 영양소, 성장인자, 호르몬, 가스를 공급하는 기질 또는 배지가 있는 적합한 용기로 구성된다. 세포 배양에는 1차 배양, 2차 배양, 계대 배양 등의 방법이 사용된다. 2. 동물세포의 특성 대부분의 동물세포들은 영양분이 아무리 잘 공급된다 하더라도 증식하지 않으며, 필요에 따라서...2025.01.16
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생화학 실험/실습 보고서 (PCR)2025.01.231. DNA DNA는 살아있는 모든 유기체 및 많은 바이러스의 유전적 정보를 담고 있는 실 모양의 핵산 사슬이다. DNA는 2개의 뉴클레오타이드 가닥이 결합하여 이중나선 구조를 이루고 있으며, 각각의 가닥은 뉴클레오타이드 단량체들의 복합체로 염기, 디옥시리보오스, 인산염 3가지로 구성되어 있다. DNA의 상보성은 DNA 정보 저장, 복제, 전사 등에 기여한다. 2. RNA RNA는 DNA와 더불어 핵산이라고 하는데, 지방, 단백질, 탄수화물과 더불어 생명체를 이루는 주된 물질이다. RNA는 DNA와 마찬가지로 뉴클레오타이드가 연결된...2025.01.23
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Bradford법을 이용한 단백질의 정량 분석2025.01.151. 단백질 정량 분석 실험 목적은 Bradford법을 이용하여 단백질 정량을 하고 Standard curve를 그리는 것입니다. Bradford법은 산성용액에서 Coomassie brilliant blue 염료가 단백질과 결합하여 최대 흡광도가 595 ㎚로 이동하는 원리를 이용합니다. 따라서 595 ㎚에서의 흡광도가 단백질 농도와 비례합니다. 이 방법은 빠르고 비단백질성분들에 의한 방해도 거의 없어 실험실에서 가장 자주 사용하는 단백질 정량법입니다. 2. 단백질 정량의 중요성 단백질 정량은 생화학 실험에서 기본이 되는 과정입니다....2025.01.15
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생화학 실험/실습 보고서 (DNA Gel electrophoresis)2025.01.231. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 엔도뉴클레아제로서 재조합 DNA를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소의 종류에는 1형, 2형, 3형, 4형, 5형 등이 있으며, 각각 인식하는 염기서열과 절단 방식이 다르다. 하나의 플라스미드는 여러 제한효소에 의해 자를 수 있다. 2. 전기영동 Agarose gel에서의 DNA pattern은 smear, 용해되지 않은 물질과 고분자량의 DNA, RNA cloud, supercoiled plasmid, relaxed 또는 nicked c...2025.01.23
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박테리아의 형질전환 실험 보고서2025.01.231. 박테리아의 형질전환 이 보고서는 생화학 실험실에서 수행한 박테리아의 형질전환 실험에 대한 내용을 다루고 있습니다. 실험의 목적은 클로닝 기술을 이해하고, 박테리아의 유전형질을 형질전환시켜 형질전환 효율을 구하는 것입니다. 보고서에는 박테리아의 특성, 클로닝과 형질전환의 원리, 실험에 사용된 시약 및 기구, 실험 방법과 결과, 고찰 등이 자세히 설명되어 있습니다. 1. 박테리아의 형질전환 박테리아의 형질전환은 매우 중요한 생물학적 과정입니다. 박테리아는 자신의 유전자를 다른 박테리아에게 전달할 수 있는데, 이를 통해 유용한 유전...2025.01.23
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생화학 실험 보고서 - 박테리아 형질전환2025.01.271. 박테리아 형질전환 이번 실험에서는 화학적 방법을 사용하여 박테리아 세포에 재조합 DNA를 도입하는 형질전환 실험을 수행하였다. 실험에 사용된 competent cell은 CaCl2와 glycerol 처리를 통해 세포막의 투과성을 높여 DNA 도입을 용이하게 하였다. 또한 heat shock 과정을 거쳐 세포막의 유동성을 증가시켰다. 형질전환 효율은 colony 수를 통해 계산하였으며, 실험 결과와 고찰을 통해 competent cell 농도와 희석 과정이 형질전환 효율에 영향을 미치는 것을 확인하였다. 1. 박테리아 형질전환 ...2025.01.27
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