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[생화학실험] A+, PCR 및 agarose gel 전기영동 실험2025.01.071. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 원하는 DNA band만을 증폭 가능하며, 이때 DNA polymerase가 사용된다. 30-40 cycle 정도 반복하여 증폭하고자 하는 표적 DNA의 한 DNA 사슬 3'말단에 상보적인 것과 그 반대 사슬의 3'말단에 상보적인 2개의 특정 올리고데옥시뉴클레오티드를 합성하고, 이를 원하는 절편을 함유한 변성된 한 가닥의 표적 DNA와 혼성화 반응 시킨다. DNA polymerase는 Taq DNA polymerase를 사용하며, 이는 열에 안정성이 있는 DNA...2025.01.07
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PCR 결과 확인(전기영동)2025.01.181. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR(polymerase chain reaction)법은 DNA 또는 RNA의 특정영역을 시험관 내에 대량으로 증폭하는 기술이다. PCR은 Denaturation, Primer Annealing, Strand Extension의 세 가지 단계로 이루어지며 세단계가 한번 반복될 때마다 처음 양의 2배로 DNA 양이 증폭된다. PCR에 사용되는 중합효소는 Taq 1 polymerase로 이것은 Thermus aquaticus로부터 추출한 효소이다. PCR 반응 산물은 seq...2025.01.18
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생화학 실험 보고서 - PCR2025.01.271. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 중합효소 연쇄반응으로, 열을 가하여 DNA의 특정 부분을 증폭시키는 기술이다. reverse transcription PCR은 mRNA에 대해 PCR을 적용하기 위한 방법으로, mRNA를 역전사시켜 cDNA를 합성하고 primer와 DNA polymerase를 이용해 DNA의 일부분을 복제, 증폭시킨다. PCR은 Denaturation, Annealing, Extension의 3단계로 진행되며, 주형 DNA, primer, dNTP, DNA polymerase가 ...2025.01.27
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[환경공학실험] PCR 및 전기영동법2025.01.131. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 유전자를 증폭하는 방법으로, 이미 알고 있는 일부의 염기서열 중 특정 DNA 부위를 반복 합성하여 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법이다. PCR은 보통 25 ~ 35 cycle로 실시하며, 이를 통해 특정 부위의 DNA를 수시간 내에 어마어마하게 증폭할 수 있다. 증폭된 DNA는 다양한 실험에 이용될 수 있고, 의학연구에 응용할 수 있다. 2. 전기영동법 전기영동법은 주로 생체 고분자들의 성질을 연구하고, 그것들을 분석, 분리, 정제하는 중요한 방법 중 하나이다. DNA, RNA, 단백...2025.01.13
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PCR 활용한 유전자 증폭 실험 예비레포트2025.01.191. Polymerase Chain Reaction (PCR) PCR은 Denaturation, Annealing, Extension 등의 과정을 거쳐 특정 DNA 영역을 증폭시키는 분자 생물학적 기술이다. PCR 기법에는 다양한 종류가 존재하며, 민감도 상승을 위한 Nested PCR, 미지 영역의 서열 확인을 위한 Inverse PCR, RNA를 분석하는 RT-PCR 등이 있다. PCR에 필요한 구성 요소는 내열성 DNA polymerase, 2가 양이온, dNTP, 주형 DNA, Buffer, forward/reverse pr...2025.01.19
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Gel 제조 (SDS-PAGE 실험을 위한 사전 준비) 보고서2025.01.131. 전기영동 전기영동은 DNA와 단백질과 같은 생체 고분자들을 분리 및 정제하는 방법입니다. 전기영동 원리는 음전하를 띄고 있는 생체고분자(DNA/단백질)들에게 전기적 힘(-음전하 ->＋양전하)을 가해주어, 물질이 사이즈에 따라 분리되는 것입니다. DNA 전기영동과 단백질 전기영동(SDS-PAGE)의 차이는 DNA는 음전하를 띄고 있어 Agarose(한천) Gel에서 관찰할 수 있지만, 단백질은 양, 음전하를 갖고 있어 SDS-sample buffer와의 혼합이 필요하며 Poly Acrylamide gel에서 관찰할 수 있습니다....2025.01.13
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형질전환 실험보고서2025.05.041. 형질전환 형질전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포 cell에 넣어 그 원핵 세포가 본래 성질과는 다른 새로운 유전형질을 나타내게 하여 삽입한 plasmid를 대량으로 키우는 과정이다. 형질전환은 폐렴구균을 통해 DNA가 유전물질임을 PCR과 클로닝 등의 방법으로 증명했다. 인슐린의 경우 처음에는 돼지에게서 추출했지만 많은 수요에 비해 공급은 원활하지 못 했고 깨끗하지 않을 수도 있다는 의견 때문에 중지되었다. 그 후, 인간에게서 인슐린을 만드는 단백질(염기서열)을 찾아내어 인슐린을 공급할 방...2025.05.04
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PCR을 진행하기 위한 Primer design 및 전기영동 레포트 (A+ 평가자료)2025.05.081. Primer design Primer를 designing 하는 과정에서 Primer와 template DNA의 특이적인 결합이 가능할 수 있는 이유에 관하여 의문을 가져볼 수 있었고, Primer의 결합이 정상적으로 이루어지기 위해서는 어떤 조건을 갖추어야 하는지에 관하여 탐구해볼 수 있었다. Primer의 길이, 염기서열 구성, Tm 값 등의 조건을 고려해야 한다는 것을 알 수 있었다. 2. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR 과정을 거쳐 target으로 하는 DNA A를 전기영동을 해보았고, 그...2025.05.08
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SDS-PAGE를 통한 단백질 분리 실험2025.01.031. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질을 분자량에 따라 분리하는 기법으로, 단백질을 SDS로 변성시켜 모든 단백질이 유사한 전하/분자량 비를 가지도록 만든 후 전기영동을 통해 분리한다. 이 실험에서는 SDS-PAGE의 원리와 사용되는 시약들의 특성을 이해하고, 실제로 단백질 분리 실험을 진행하여 결과를 분석하였다. 2. 단백질 변성 SDS는 단백질의 3차원 구조를 풀어 선형 구조로 만들어 주며, 단백질에 음전하를 부여한다. 이를 통해 단백질의 고유 전하와 상관없이 분자량에 따라 분리할 수 있게 된다. 실험에서는 단백질 시료를...2025.01.03
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[서강대학교 현대생물학실험2] (1차 풀레포트) Competent Cell, PCR, gel electrophoresis2025.01.221. 배지 세포를 배양하기 위해 영양분을 함유한 물질을 배지라고 한다. Sterilization은 무균 상태의 배지를 조제할 때 필요한 과정으로, heat, chemical, radiation 등의 방법으로 멸균 처리할 수 있다. 2. Competent cell Competent cell은 외부 유전물질을 수용하여 세포의 형질을 전환시킬 수 있는 세포이다. 본실험은 LB(Luria-Bertani) 배지를 액체와 고체 상태로 조제하여 고온, 고압의 수증기로 멸균하였고, 조제한 배지에 항생제 내성 유전자를 가진 plasmid를 삽입한 ...2025.01.22
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