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[화공생물공학기초실험 A+예비레포트] 유산균 음료로부터 미생물 분리 평판 계수법2025.01.121. 유산균 분리 및 배양 이 실험에서는 유산균 음료에서 유산균을 분리하고 평판 계수법을 이용하여 유산균의 수를 측정하였습니다. 유산균은 젖산발효를 통해 유기물을 분해하는 미생물로, 식품 및 의약품 제조에 널리 이용되고 있습니다. 실험에서는 BCP 배지와 MRS 배지를 사용하여 유산균을 선택적으로 배양하고 정량하였습니다. 또한 무균 조작법, 멸균 기법, 미생물 계수법 등의 기본적인 미생물학 실험 기술을 익힐 수 있었습니다. 2. 미생물 생장 곡선 미생물의 생장 곡선은 크게 4단계로 나뉩니다. 첫 번째는 유도기로, 새로운 배지에 접종...2025.01.12
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완충용액 제조 및 pH 측정2025.01.031. 산 · 염기의 기본 개념과 pH 실험에서는 산 · 염기의 기본 개념과 pH의 의미를 이해하고자 한다. pH는 수용액 내 수소이온 농도를 나타내는 척도로, 산성과 염기성을 구분하는데 사용된다. 강산과 강염기는 100% 이온화되어 pH 변화가 크지만, 약산과 약염기는 일부만 이온화되어 완충작용을 통해 pH 변화를 완화시킬 수 있다. 2. 완충용액의 사용 이유 생화학 및 생명과학 실험에서는 pH 변화에 민감한 반응이 많이 일어나므로, 완충용액을 사용하여 pH를 일정하게 유지시켜 주는 것이 중요하다. 완충용액은 약산과 그 짝염기, 또...2025.01.03
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Cell harvest and protein assay2025.01.231. Cell harvest 세포 배양 시 adherent cell과 suspension cell로 구분할 수 있으며, adherent cell을 harvest하는 방법에는 화학적 방법(trypsin, accutase 사용)과 물리적 방법(scraper 사용)이 있다. 이번 실험에서는 물리적 방법인 scraper를 사용하여 adherent cell을 harvest하였다. 2. Protein extraction 세포 내 단백질을 추출하기 위해 lysis buffer와 phosphatase/protease inhibitor를 사용하여 ...2025.01.23
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헤모글로빈 측정 시험2025.01.131. 헤모글로빈 측정 헤모글로빈(Hb)의 농도를 측정하는 실험이다. 헤모글로빈 농도 측정은 빈혈을 진단하는 필수적인 생화학적 조사 방법이며, 적혈구 증가증의 중요한 지표가 되므로 헤모글로빈 농도 측정 실험을 숙지할 수 있어야 한다. 또한 많은 실험에서 사용되는 micro 피펫의 사용법을 숙지한다. 2. 분광광도계 사용 분광광도계는 빛을 이용하여 투과/반사율 등을 측정하여 샘플과 미지 시료의 구성, 농도 등을 측정할 수 있는 기계로서 광원, 검출기, 단색 화장치로 구성되어 있다. 분광광도계를 사용하여 시료의 흡광도를 측정할 때는 반드...2025.01.13
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[예비] PCR을 이용한 DNA 증폭2025.01.221. PCR 기술 PCR 기술은 DNA의 특정 부분을 증폭하는 기술로, 1983년 Kary Mullis에 의해 개발되었습니다. PCR의 원리는 자연적인 DNA 복제 과정에서 영감을 받았는데, DNA 복제는 세포 내에서 DNA 폴리머레이즈 효소에 의해 이루어지며, 이 효소는 DNA의 주형 가닥을 읽고 상보적인 뉴클레오타이드를 추가하여 새로운 DNA 가닥을 만듭니다. 2. DNA 복제 과정 DNA 복제 과정은 크게 3가지로 진행됩니다. 1) 시작: 복제 기점에서 DNA 이중나선이 풀리고 단일 가닥으로 분리됩니다. 2) 신장: 프라이머가...2025.01.22
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세포 계수 및 배양접시 seeding2025.01.021. Hemocytometer를 이용한 세포 계수 Hemocytometer는 혈액 중의 적혈구, 백혈구, 호산구 등의 세포를 세기 위해 고안된 현미경 슬라이드입니다. Hemocytometer의 격자 구조와 틈새 높이를 이용하여 세포 현탁액의 농도를 계산할 수 있습니다. 또한 trypan blue 염색을 통해 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 이를 통해 실험에 필요한 적절한 농도의 세포를 준비할 수 있습니다. 2. 세포 계수 방법 Hemocytometer 외에도 flow cytometry, CFU counting, s...2025.01.02
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마우스 꼬리로부터 게놈 DNA 추출 및 분석2025.01.041. 게놈 DNA 추출 실험을 통해 마우스 꼬리에서 게놈 DNA를 추출하는 과정을 이해하였습니다. 세포 용해, DNA 정제, 농도 측정 등의 단계를 거쳐 순도 높은 게놈 DNA를 얻을 수 있었습니다. 이 과정에서 주의해야 할 점들, 예를 들어 과도한 tapping이나 오염물질 혼입 등을 확인하였습니다. 2. DNA 전기영동 추출한 게놈 DNA를 아가로스 겔 전기영동을 통해 분석하였습니다. 10,000 bp 이상의 큰 DNA 단편이 가장 뚜렷하게 관찰되었지만 번진 모습(smear)을 보였고, 그 외에도 1,000-2,000 bp 및 ...2025.01.04
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생화학실험 단백질의 정성분석2025.05.061. Western blot Western blot은 단백질을 폴리아크릴아마이드 겔에서 전기영동을 이용하여 분리하고, 니트로셀룰로오스 membrane에 옮긴 후 찾고자 하는 단백질의 항체(1차 항체)와 결합시킨 후 이 항체와 반응하는 2차 항체를 이용하여 밴드를 형상화하는 기술이다. 이 기술은 크기별 분리, 단백질을 고체 지지체로 이동, 1차 및 2차 항체를 사용하여 표적 단백질을 표시하여 시각화하는 3가지 요소를 사용한다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 질량에 의한 단백질 분리가 가능한 전기 영동법이다. 폴리아크릴아마이드...2025.05.06
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크로마토그래피 결과 레포트2025.01.021. 크로마토그래피의 원리 크로마토그래피는 분배 이론을 기반으로 합니다. 물질들은 이동상(mobile phase)과 정지상(stationary phase)으로 구성된 계에 놓이게 되며, 각 물질의 상대적 움직임은 이동상의 움직임과 이동상의 움직임 지연효과들 사이의 균형의 결과입니다. 지연효과에는 대표적으로 분배가 있으며, 크로마토그래피에서 분배계수는 정지상에 있는 용질의 농도와 이동상에 있는 용질의 농도의 비율로 계산됩니다. 분배계수가 크면 클수록 더 많은 분자들이 정지상에 있게 되어 용질이 컬럼을 통해 느리게 이동하게 됩니다. 2...2025.01.02
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유기물의 성질과 분리를 통한 일반화학실험2025.01.031. 유기물의 용해도 많은 유기물들은 분자 내에 작용기를 가지고 있어 수용액의 특성에 따라 물에 대한 용해도가 달라질 수 있습니다. 벤조산은 중성이나 산성 수용액에서는 난용성이지만 염기성 수용액에서는 카복실산이 중화되어 카복실산 음이온으로 전환되어 극성이 커지므로 물에 잘 녹습니다. 2. 유기물 혼합물의 분리 벤조산과 아세트아닐라이드의 혼합물을 각각 산성과 염기성으로 분리할 수 있습니다. 혼합물을 염기 수용액으로 처리하면 벤조산은 해리되면서 녹고, 해리되지 않은 불용성 아세트아닐라이드는 수용액 중에 고체로 남게 됩니다. 혼합물을 여...2025.01.03