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제한효소 지도 작성 및 DNA 분석2025.11.121. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 염기서열을 인식하여 그 부위에서 DNA를 절단하는 단백질입니다. 각 제한효소는 고유한 인식 부위를 가지고 있으며, 이를 이용하여 DNA를 특정 위치에서 절단할 수 있습니다. 제한효소 지도 작성에서는 여러 제한효소를 사용하여 DNA를 절단하고, 생성된 단편의 크기를 분석하여 DNA 상의 제한효소 인식 부위의 위치를 결정합니다. 2. 제한효소 지도 작성(Restriction Mapping) 제한효소 지도 작성은 DNA 분자 상에서 제한효소의 인식 부위 위치를 파악...2025.11.12
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플라스미드 DNA 준비 및 제한효소 지도 작성2025.11.121. 플라스미드 DNA 준비 플라스미드는 박테리아 세포에서 발견되는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 공학 실험에서 중요한 벡터로 사용됩니다. 플라스미드 DNA 준비 과정은 박테리아 배양, 세포 용해, DNA 추출 및 정제 단계를 포함하며, 순수한 플라스미드 DNA를 얻기 위해 여러 정제 기법이 적용됩니다. 이 과정을 통해 얻은 플라스미드는 분자생물학 연구와 유전자 클로닝에 필수적인 재료입니다. 2. 제한효소 지도 작성 제한효소 지도(Restriction map)는 DNA 분자 위에서 특정 제한효소의 인식 부위와 절단 위치를 나타내...2025.11.12
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제한효소를 이용한 DNA절단 및 전기영동 실험2025.11.131. 제한효소와 DNA절단 제한효소는 특정한 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하는 효소이다. 실험에서 사용된 EcoR1과 HindⅢ 같은 제한효소들은 각각 다른 염기서열을 인식하여 DNA를 절단한다. 절단된 DNA의 말단 모양에 따라 blunt end(직선으로 잘린 경우)와 sticky end(ㄴ방향에서 ㄱ방향으로 꺾여서 잘린 경우)로 분류된다. 2. Sticky end와 Blunt end의 특성 Sticky end는 핵산 한가닥의 염기들이 노출되어 있어 상보적인 염기와 수소결합할 준비가 되어있다. 반면 blunt end는 직선으로...2025.11.13
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Hartl 유전학 정리노트 04. 유전자 연관과 유전자 지도 작성2025.05.101. 유전자 연관 유전자 연관은 동일한 염색체에 있는 유전자들이 함께 유전되는 현상을 말한다. 연관된 대립유전자들은 감수분열 시 서로 같이 있으며, 재조합 빈도를 통해 유전자 간의 거리를 측정할 수 있다. 재조합 빈도가 낮을수록 유전자 간 거리가 가깝다. 유전자 지도 작성에는 다형성 DNA 서열이 사용되며, 이를 통해 유전병 유발 유전자를 찾을 수 있다. 2. 유전자 지도 작성 유전자 지도 작성에는 재조합 빈도, 삼점교배, 다형성 DNA 서열 등이 활용된다. 재조합 빈도를 통해 유전자 간 거리를 측정할 수 있으며, 삼점교배를 통해 ...2025.05.10
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유전자와 유전자 활성 연구를 위한 분자도구2025.01.181. 서던블롯 서던블롯은 특정 DNA 절편을 동정하는 데 사용되는 기술입니다. 이 방법은 genomic DNA를 제한효소로 자른 후 아가로스 겔 전기영동을 통해 크기별로 분리합니다. 그리고 DNA를 변성시켜 nitrocellulose 또는 nylon 멤브레인으로 이동시킵니다. 이렇게 이동된 DNA는 방사선 동위원소나 비방사선 물질로 표지된 DNA 또는 RNA 탐침과 하이브리다이제이션되어 자기방사법 등을 통해 검출됩니다. 이 기술은 genomic DNA뿐만 아니라 plasmid, cosmid, bacteriophage 등의 분석에도 ...2025.01.18
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동 실험2025.11.171. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 DNA를 특정 염기서열에서 절단하는 효소로, 클로닝 벡터와 삽입 DNA의 적절한 제한효소 부위 결정이 중요합니다. 각 제한효소는 서로 다른 특성을 지니며 최적온도(25℃~64℃)와 최적 완충용액 상태에서 절단반응을 수행해야 합니다. 활성단위 1U는 특정 제한효소 자리를 가진 1μg DNA를 1시간 내에 절단할 수 있는 효소의 양입니다. Type I, II, III으로 구분되며, 실험실에서는 주로 특이성이 높은 Type II를 사용합니다. 2. DNA 절단 말단(Sticky...2025.11.17
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람다 파지 DNA 관찰, PFU test 및 Optical mapping_서강대학교 바이오융합기술프로젝트1 레포트2025.01.191. λ phage DNA 관찰 실험에서는 DNA damaging을 이해하기 위한 첫 단계로 λ phage를 이용하여 DNA observation을 진행하였다. DNA가 포함된 plug에 proteinase K를 처리하여 phage의 구조 단백질과 DNase를 제거하고, (+)전하 cover glass 위에 DNA를 고정시켜 관찰하였다. PDMS nanochannel을 사용하여 DNA가 일직선으로 펴지도록 하여 관찰하였다. 2. PFU test PFU test를 통해 미지의 농도의 λ phage 용액 내 phage 입자의 개수를 확...2025.01.19
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제한효소를 이용한 플라스미드 DNA 분석 및 전기영동2025.11.121. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 DNA의 특정한 부위를 인식하여 phosphodiester bond를 절단하는 효소이다. 본 실험에서 사용된 HindIII 효소는 DNA상에서 T와 C 사이의 결합을 끊어 원형의 플라스미드 DNA를 선형 형태로 변환한다. 제한효소의 특이성에 따라 DNA의 특정 사이트를 찾아 절단하며, 이를 통해 제한효소 지도를 작성할 수 있다. 2. 아가로스 겔 전기영동(Agarose Gel Electrophoresis) DNA 조각을 분리하고 인식하는 가장 일반적인 방법으로, 간단하고 ...2025.11.12
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PCR과 제한효소 절단 분석 결과2025.11.131. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 샘플을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 열변성, 프라이머 결합, DNA 중합효소에 의한 신장 단계를 반복하여 특정 DNA 영역을 기하급수적으로 증폭합니다. 이 과정은 유전자 진단, 법의학, 질병 검출 등 다양한 분야에서 필수적인 도구로 사용되며, 정확한 온도 제어와 사이클 수 조절이 중요합니다. 2. 제한효소 절단 (Restriction Enzyme Digestion) 제한효소는 특정 DNA 서열을 인식하여 절단하는 단백질입니다. 제한효소 절단은 PCR 산물을 분석하기 위...2025.11.13
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PCR과 제한효소 절단 실험 예비2025.11.131. PCR (중합효소연쇄반응) PCR은 DNA 샘플의 특정 영역을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 열변성, 프라이머 결합, DNA 중합효소에 의한 신장 단계를 반복하여 목표 DNA 서열을 기하급수적으로 증폭합니다. 이 기술은 유전자 진단, 법의학, 질병 검출 등 다양한 분야에서 필수적인 도구로 사용됩니다. 2. 제한효소 절단 (Restriction Enzyme Digestion) 제한효소는 특정 DNA 서열을 인식하여 절단하는 단백질입니다. 각 제한효소는 고유한 인식 부위를 가지며, 이를 이용하여 DNA를 특정 위치에서...2025.11.13
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