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Plasmid DNA 정제2025.01.131. 대장균(E. coli) 대장균(E.coli)은 Theodor Esherich의 이름을 따서 발견되어 명명된 박테리아이다. 특징으로는 그람음성의 간균이며, 포자 생성을 하지 않으며, 1-2 microns x 30-30 micron (1 micron = 0.001 mm)크기이고, 섭씨 37도에서 쉽게 자랄 수 있다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA란 세균 속에 주 DNA와 별도로 존재하면서 증식할 수 있는 고리 형태의 DNA로, 원핵생물과 효모 등에서 발견된다. 대장균 세포에서 분리된 Plasmid DNA는 sup...2025.01.13
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플라스미드 DNA의 분리 및 정제 방법2025.01.041. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 세균 세포에서 분리할 수 있으며, 일반적인 total cell DNA 분리 방법과 유사하다. 세포를 배양하여 수확하고 세포 추출물을 만든 후, 단백질을 제거하고 에탄올 침전으로 DNA를 농축할 수 있다. 그러나 플라스미드 DNA 분리에는 세균 염색체 DNA와의 분리가 중요한 차이점이다. 플라스미드는 세균 염색체에 비해 크기가 작고 구조적 차이가 있어 이를 이용하여 분리할 수 있다. 2. 플라스미드 미니프레프 방법 플라스미드 DNA를 소량으로 분리하는 대표적인 방법으로는 알칼리 용해법,...2025.01.04
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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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유전공학 기술 (DNA 분리 및 정제, PCR, 재조합 DNA)2025.04.301. 유전공학 유전공학은 DNA의 인위적인 변형을 통해 유전물질을 변화시키는 기술로, 의약품 분야, 환경, 농축산 분야 등에 활용되고 있다. 주요 기술로는 DNA 분리 및 정제, 재조합 DNA, PCR(중합 효소 연쇄반응) 등이 있다. 2. DNA 분리 및 정제 플라스미드 DNA는 유전공학적 실험에서 vector DNA로 사용되며, 알칼리 용해법을 통해 분리할 수 있다. 이 방법은 세포막을 파괴하고 DNA를 변성시켜 플라스미드 DNA를 추출한다. 3. 재조합 DNA 재조합 DNA 기술은 연구하고자 하는 유전자를 세균의 플라스미드에 ...2025.04.30
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[A+ 리포트] - LB Agar Plate 제작 (분자생물학실험)2025.04.251. 분자생물학 실험 이 자료는 분자생물학 실험의 일환으로 LB agar plate를 제작하는 과정을 설명하고 있습니다. LB agar의 개념과 구성, Ampicillin이 포함된 LB agar plate 제작 방법, 제한효소를 통한 DNA 절단 과정, DNA 정제 방법 등에 대해 자세히 다루고 있습니다. 2. 미생물 배양 이 자료는 미생물 배양에 가장 일반적으로 사용되는 LB agar plate의 제작 과정을 설명하고 있습니다. LB agar MIX의 구성 성분과 각 성분의 역할, 고압증기멸균 과정, Ampicillin 첨가 등 ...2025.04.25
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아주대 생명과학실험 Plasmid DNA 추출2025.01.131. 플라스미드 DNA 플라스미드 DNA는 원핵세포의 세포질 및 진핵생물의 세포 소기관에서 발견되는 작고 원형의 이중 가닥 DNA 분자이다. 이 DNA 조각들은 자율적으로 복제할 수 있으며, 세포의 염색체 DNA와는 독립적으로 존재한다. 플라스미드는 보통 추가적인 유전 정보를 포함하고 있으며, 특정 환경 조건에서 숙주 세포에 유익할 수 있는 기능들을 부여한다. 2. 제한효소 제한효소(EcoRI)는 플라스미드 DNA를 실험실에서 조작하기 위한 주요 도구이다. 이 효소는 특정 짧은 DNA 서열을 인식하고 절단할 수 있는 능력이 있어, ...2025.01.13
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플라스미드 DNA 추출 예비 레포트2025.01.031. 플라스미드 DNA 추출 이 예비 레포트는 플라스미드 DNA 분리 방법을 이해하고 순수한 플라스미드 DNA를 추출하는 실험을 설명합니다. 플라스미드는 세균의 염색체 외부에 존재하는 독립적으로 증식할 수 있는 DNA 분자로, 유전자 클로닝, 유전자 전달, 유용 단백질 생산 등에 활용됩니다. 플라스미드 DNA 추출 방법에는 크기 차이와 구조 차이를 이용하는 방법이 있으며, 주로 알칼리 변성법을 사용합니다. 이 실험에서는 세포 용해, 단백질 제거, DNA 정제 등의 과정을 거쳐 순수한 플라스미드 DNA를 얻는 방법을 설명하고 있습니다...2025.01.03
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TECAN을 이용한 DNA quality check와 전기영동을 통한 대장균의 병원성 유형 확인2025.01.121. DNA 추출 및 정제 세포로부터 DNA를 분리하기 위해서는 먼저 세포 내 DNA가 세포 밖으로 유출될 수 있도록 세포벽 및 세포막을 분해시켜야 한다. DNA 추출은 크게 세 단계로 이루어지며, sample의 세포막을 제거하는 단계인 Lysis, DNA 구조를 제외한 불순물을 제거하는 단계인 Washing, 불순물이 필터링된 DNA 샘플만을 tube에서 용출해내는 단계인 Elution이 있다. 2. DNA quality check 추출한 DNA는 DNA quality check를 해주고, Nucleic acid quantific...2025.01.12
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분자생물학 실험 (A+) Purification of plasimid from bacterial cells 결과보고서2025.01.041. 분자생물학 실험 이 보고서는 박테리아 세포에서 플라스미드를 정제하는 실험에 대한 내용을 다루고 있습니다. 실험 과정에서 플라스미드 추출, 정제, 확인 등의 단계를 거치며, 실험 결과와 분석이 포함되어 있습니다. 이를 통해 분자생물학 실험 기법과 플라스미드 조작 기술을 익힐 수 있습니다. 2. 플라스미드 정제 박테리아 세포에서 플라스미드를 추출하고 정제하는 과정이 자세히 설명되어 있습니다. 세포 용해, 단백질 제거, DNA 정제 등의 단계를 거치며, 최종적으로 순수한 플라스미드 DNA를 얻는 것이 목표입니다. 이러한 기술은 유전...2025.01.04
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구강상피로부터 DNA 추출 실험 보고서2025.05.141. DNA 추출 과정 DNA 추출 과정에서 사용되는 다양한 용액들의 역할에 대해 자세히 설명하고 있습니다. PBS 용액은 세포의 삼투압 변화를 방지하고, GL-buffer는 계면활성제를 포함하여 세포막을 파괴하는 역할을 합니다. Proteinase K와 RNase A는 각각 단백질과 RNA를 분해하여 DNA를 정제하는데 사용됩니다. 이후 Spin column을 이용한 정제 과정에서는 Chaotropic agent와 고농도 염이 DNA를 실리카 막에 흡착시키는 역할을 합니다. 2. PCR 실험 설계 PCR 실험에서 실험군과 대조군을...2025.05.14
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