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RNA 준비 및 cDNA 합성: 형질도입 방법론2025.11.141. 형질도입(Transfection) 형질도입은 바이러스의 핵산이나 플라스미드 벡터를 정제하여 진핵세포 내에 도입하는 과정이다. 원핵세포에 도입될 경우는 형질전환(transformation)이라 한다. 세포막의 인지질 이중층은 인산기로 인해 음전하를 띠고 있으며, 핵산도 음전하를 가지고 있어 자발적 도입이 어렵다. 따라서 화학적, 물리적, 생물학적 방법을 이용하여 세포막을 통과시킨다. 2. 화학적 형질도입 방법(Reagent-based Method) 화학적 방법으로는 양이온성 지질(cationic lipids), 인산칼슘(calc...2025.11.14
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식물분자생물학실험 Agrobacterium 매개 식물 형질전환 예비보고서2025.01.181. Agrobacterium 매개 식물 형질전환 Agrobacterium을 매개체로 활용하여, 식물에 유전자를 도입하여 형질전환하는 방법에 대하여 학습한다. 유전적 형질전환이란 수용자 세포가 외부 유전물질을 받아들여 자신의 유전정보에 도입하는 과정을 통해 유전자의 변환이 일어나는 현상을 말한다. 식물의 유전자를 변형시키기 위한 방법으로 가장 널리 활용되고 있는 방법은 Agrobacterium 매개 형질전환이다. Agrobacterium tumefaciens는 다수의 외떡잎 혹은 쌍떡잎 속씨식물들과 겉씨식물에 DNA를 전달할 수 있...2025.01.18
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반응능 세포(Competent Cell) 제조 실험2025.11.171. 유전자 재조합 기술 특정 유전자가 클로닝된 재조합 플라스미드 DNA를 세포 내에 도입하여 특정 유전자를 다량 확보하거나 발현시켜 원래의 생명체가 만들지 않는 특정 단백질을 생산하는 기법입니다. 표적 DNA를 공여 세포로부터 분리한 후 제한효소로 절단하고, 벡터 DNA와 연결하여 재조합 DNA를 만든 후 숙주세포에 도입하여 형질전환시키는 과정으로 진행됩니다. 2. 반응능 세포(Competent Cell) 유전자 도입에 사용되는 숙주세포로, 외부의 DNA를 받아들일 수 있도록 인위적으로 만들어진 세포입니다. 대장균이 가장 널리 사...2025.11.17
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분자생물학 실험 (A+) DNA ligation and transformation 결과보고서2025.01.041. DNA 연결(ligation) DNA 연결(ligation) 실험을 통해 DNA 단편을 벡터에 삽입하는 과정을 수행했습니다. 이를 통해 재조합 DNA를 만들어 대장균에 형질전환하는 실험을 진행했습니다. 실험 결과 성공적으로 재조합 DNA를 만들어 대장균에 도입할 수 있었습니다. 2. 형질전환(transformation) 대장균에 재조합 DNA를 도입하는 형질전환 실험을 수행했습니다. 실험 결과 형질전환된 대장균 세포를 선별할 수 있었고, 이를 통해 재조합 DNA가 성공적으로 도입되었음을 확인할 수 있었습니다. 1. DNA 연결...2025.01.04
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DNA 연결 및 형질전환 실험 예비2025.11.131. DNA Ligation (DNA 연결) DNA 연결은 DNA ligase 효소를 이용하여 두 개의 DNA 분자를 공유결합으로 연결하는 과정입니다. 제한효소로 절단된 DNA의 5' 인산기와 3' 수산기 사이의 포스포디에스터 결합을 형성하여 DNA 분자를 연결합니다. 이 과정은 재조합 DNA 기술에서 벡터와 삽입 DNA를 연결하는 데 필수적인 단계입니다. 2. Transformation (형질전환) 형질전환은 외부에서 도입된 DNA가 세포 내로 들어가 세포의 유전자형을 변화시키는 과정입니다. 박테리아의 경우 화학적 방법이나 전기천...2025.11.13
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Ligation & Transformation 예비레포트2025.11.151. DNA Ligation (DNA 연결) 유전자 클로닝 과정에서 DNA ligase 효소를 이용하여 insert DNA와 vector DNA를 연결하는 실험. 제한효소로 처리된 DNA 말단을 DNA ligase 효소로 연결하여 재조합 DNA를 만드는 과정. 50ng의 vector DNA에 대해 1:1, 1:5, 1:10 등의 비율로 insert DNA를 혼합하고, 37℃에서 1시간 반응시켜 DNA 연결을 수행한다. 2. Bacterial Transformation (박테리아 형질전환) 재조합 DNA를 대장균(CP cell)에 도...2025.11.15
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박테리아 형질 전환, DNA 준비, 제한효소를 이용한 DNA 절단 실험 예비 및 결과 보고서2025.01.041. 박테리아 형질 전환 박테리아 형질 전환은 박테리아 세포가 외부 DNA를 흡수하여 새로운 유전적 특성을 획득하는 과정입니다. 이를 통해 박테리아는 항생제 내성, 독소 생산 등의 새로운 기능을 얻을 수 있습니다. 이 실험에서는 박테리아 형질 전환 과정을 수행하고 그 결과를 보고하고 있습니다. 2. DNA 준비 DNA 준비 과정에서는 DNA를 추출, 정제하여 실험에 사용할 수 있는 상태로 만드는 것이 중요합니다. 이를 통해 순수한 DNA를 얻을 수 있으며, 후속 실험에 활용할 수 있습니다. 3. 제한효소를 이용한 DNA 절단 제한효...2025.01.04
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P1 박테리오파지를 이용한 형질도입 실험2025.11.111. 박테리오파지(Bacteriophage) 박테리오파지는 박테리아를 감염시키는 바이러스로, 단백질 구조로 둘러싸인 핵산 분자로 구성된다. 유전물질은 ssRNA, dsRNA, ssDNA, dsDNA 등이 원형 또는 선형으로 배열되어 있다. 박테리오파지는 머리와 꼬리로 구성되며, 약 96%는 숙주세포에 유전물질을 주입할 때 사용하는 꼬리를 가지고 있다. 독성파지와 온건성 파지로 구분되며, 용균성 생활사(lytic cycle)와 용원성 생활사(lysogenic cycle)를 거친다. 2. P1 박테리오파지 P1은 대장균과 일부 박테리아...2025.11.11
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박테리아 형질전환(Bacterial Transformation) 실험 보고서2025.11.151. 형질전환(Transformation)의 정의 및 원리 형질전환은 외부 유전자를 세포에 도입하여 새로운 유전 형질을 갖도록 만드는 과정입니다. S형균의 DNA를 R형균에 도입하면 R형균이 S형균으로 변화하며, 이는 원핵생물의 유전적 다양성 확보 전략입니다. 자연 상태에서 형질전환이 일어나려면 DNA 결합 단백질, Type IV pili, Type II secretion system 등이 관여하며, 환경 영향(집단 밀도, 영양분 고갈, DNA 손상)에 따라 유도됩니다. 외래 DNA 도입 방법으로는 접합(conjugation)과 형...2025.11.15
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서울대 생물학실험 DNA Techonology (A+)2025.01.291. DNA 기술의 원리와 분석 방법 본 실험에서는 DNA와 관련된 기술과 분석 방법을 파악하고 대장균에 특정 유전자를 삽입하는 것이 목표이다. 실험을 통해 DNA 클로닝, 형질전환, PCR, 젤 전기영동, 제한효소 처리 등 다양한 DNA 기술을 학습하고 이해할 수 있었다. 2. 대장균을 이용한 DNA 기술 실험 본 실험에서는 대장균 세포에 다양한 플라스미드를 도입하여 형질전환을 유도하고, 이를 통해 DNA 기술의 원리와 분석 방법을 확인하였다. 실험 결과 플라스미드가 성공적으로 도입된 대장균 colony에서는 흰색이 나타났으며, ...2025.01.29
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