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단백질 정량 분석: BCA assay2025.01.021. 단백질 정량 분석 BCA assay는 단백질 정량 분석 방법 중 하나로, 단백질 시료에 BCA 시약을 가한 후 흡광도를 측정하여 단백질 농도를 구하는 방법이다. 이 방법은 단백질에 의해 환원된 구리 이온이 BCA와 반응하여 보라색 화합물을 형성하는 원리를 이용한다. 표준 단백질로 BSA를 사용하여 표준곡선을 그린 후, 미지의 단백질 시료의 흡광도를 대입하여 농도를 계산할 수 있다. BCA assay는 단백질의 아미노산 조성에 크게 영향을 받지 않아 비교적 정확한 정량이 가능하다는 장점이 있다. 1. 단백질 정량 분석 단백질 정...2025.01.02
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세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
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단백질 정량 분석 예비 레포트(A+)2025.05.061. 단백질 정량 분석 이 보고서는 단백질 정량 분석에 대한 내용을 다루고 있습니다. 다양한 단백질 정량 분석법(UV법, Lowry법, BCA법, Bradford법 등)에 대해 설명하고, Lowry법을 이용하여 단백질 시료를 정량하는 실험을 수행하였습니다. 또한 UV-Vis 분광광도계의 사용법을 숙지하고, 이를 통해 미지의 단백질 시료의 흡광도를 측정하였습니다. 실험 결과를 바탕으로 각 분석법의 장단점을 비교하고, 단백질 정량 분석의 원리와 응용에 대해 설명하고 있습니다. 1. 단백질 정량 분석 단백질 정량 분석은 생물학, 의학, ...2025.05.06
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 5주차 method for protein concentration determination2025.05.041. Protein Concentration Determination 이 프레젠테이션에서는 단백질 농도 측정을 위한 다양한 방법들을 소개하고 있습니다. 저브리 방법, 브래드포드 방법, BCA 방법 등 여러 가지 방법론이 설명되어 있으며, 각 방법의 원리와 장단점, 적용 범위 등이 자세히 다루어지고 있습니다. 또한 실험 절차와 계산 방법도 구체적으로 제시되어 있어 실제 실험에 활용할 수 있는 정보를 제공하고 있습니다. 2. Spectrophotometry 단백질 농도 측정을 위해 다양한 분광광도법이 소개되고 있습니다. UV 분광광도법...2025.05.04
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화공생물공학 단위조작실험1 단백질 정량법 비교2025.01.151. BCA Assay BCA Assay는 단백질이 구리 이온(Cu2+)을 1가 양이온(Cu1+)으로 환원시킬 수 있는 성질을 이용한 단백질 정량법입니다. 환원된 구리 이온은 Bicinchoninic Acid(BCA) 분자 2개와 반응하여 보랏빛의 착물을 형성하게 되며, 이 화합물의 흡광도 측정을 통해 단백질 농도를 정량할 수 있습니다. BCA Assay는 일반적인 버퍼 물질에 간섭을 덜 받고, 높은 온도에서 민감하고 빠른 반응을 할 수 있으며, 계면활성제와 함께 사용할 수 있다는 장점이 있습니다. 하지만 실온에서 반응이 완전히 수...2025.01.15
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[화공생물공학단위조작실험1] 단백질 정량법 비교 (BCA, Bradford)2025.05.111. 단백질 정량법 단백질은 다양한 종류의 아미노산이 펩타이드 결합을 통해 형성된 고분자 화합물로, 결합 길이나 아미노산 종류에 따라 화학적∙물리적 성질이 다르다. 이러한 성질의 차이로 단백질 정량법의 종류도 다양하다. 정량법에는 Biuret assay, BCA assay, Bradford assay, 동위원소 희석 LC-MS method, 분광학적 정량법 등이 있다. 2. Biuret Assay Biuret(H2N-CO-NH-CO-NH2)구조가 알칼리성의 CuSO4와 반응하면 2가의 구리이온과 보라색의 착화합물을 형성한다. Biu...2025.05.11
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단백질 검출 실험: BCA assay, 뷰렛반응, 닌히드린 반응2025.01.131. 단백질 단백질은 아미노산이 펩티드 결합으로 연결된 복잡한 사슬구조의 고분자 물질이다. 단백질의 존재를 증명하기 위해서는 발색반응을 사용할 수 있는데, 단백질 분자에 포함된 반응기가 특수한 시약과 어울려서 나타내는 반응이다. 2. BCA assay BCA assay는 알칼리의 조건에서 단백질의 펩타이드 결합과 반응하여 Cu2+가 Cu+로 환원되고, 이후 2분자의 Bicinchoninic acid(BCA)가 환원된 Cu+와 배위 결합해 562nm에서 최대 흡광도를 가지는 강한 보라색을 띠는 반응을 이용한다. Cu+의 생성은 곧 단...2025.01.13
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[10점/A+] 연세대학교 공학생물학 및 실험I 3주차 단백질의 정량2025.05.041. 단백질 단백질은 생체 내 거대 분자들 중 하나로, 거의 모든 생명체의 역동적인 기능은 단백질에 의존한다. 단백질은 대부분의 세포에서 건조 질량의 50% 이상을 차지하며, 효소 단백질, 방어 단백질, 저장 단백질, 수송 단백질, 호르몬 단백질, 수용체 단백질, 수축 및 운동 단백질, 구조 단백질 등 다양한 기능을 수행한다. 2. Bradford 단백질 정량법 Bradford 단백질 정량법은 분광광도계를 이용하여 용액 속에 함유되어 있는 단백질의 양을 분석하는 방법이다. 이 방법은 쿠마시블루 G-250 (Coomassie Blue...2025.05.04
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단백질 정량법 비교(BCA, Bradford)2025.01.271. 단백질 정량법 본 실험은 BCA Assay와 Bradford Assay를 이용하여 미지시료의 단백질 농도를 추정하고 어떤 방법이 단백질 정량에 더 적절한 방법인지 비교 분석하고자 하였다. BCA Assay 결과 미지시료의 농도는 711μg/mL, Bradford Assay 결과 1705μg/mL로 추정되었다. 표준곡선의 결정계수(R2)는 Bradford Assay가 0.9283으로 BCA Assay의 0.9094보다 약간 더 높아 신뢰성이 있는 것으로 나타났다. 그러나 국립과학원의 분석기준에 따르면 습식분석의 경우 R2가 0....2025.01.27
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Lowry protein assay(단백질 정량 분석) 예비레포트2025.01.221. 단백질 정량 분석 단백질 정량 분석은 시료 내 단백질의 양, 농도를 측정하기 위해 사용되는 방법으로 Lowry method, UV method, BCA method, Bradford method 등이 있다. Lowry method는 단백질의 펩타이드 결합이 알칼리성 조건에서 구리와 반응하는 Biuret 반응과 Folin-Ciocalteu 반응을 이용하는 방법이다. UV method는 단백질의 방향족 아미노산이 자외선을 흡수하는 특성을 이용하며, BCA method는 Lowry method의 Biuret 반응을 기반으로 한다. ...2025.01.22
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