1. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 본 실험에서는 유전자 클로닝을 위해 미리 선정한 특정 유전자를 제작된 프라이머를 이용하여 PCR로 증폭합니다. 이 과정에서 Taq 중합효소, 주형 DNA, Forward/Reverse 프라이머, dNTP 혼합물, 버퍼 등이 사용되며, PCR 기계에서 온도 사이클을 통해 DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성 단계를 반복하여 목표 DNA를 기하급수적으로 증폭합니다. 2. 프라이머 (Primer) 프라이머는 DNA 중합효소가 D...

1. Taq 중합효소의 특징 Taq 중합효소는 Thermus aquaticus에서 추출한 효소로 열 안정성이 뛰어나다. 95°C에서 40분 가열 후에도 50% 활성을 유지하며, 최적 활성 온도는 70~74°C, 최적 pH는 8.2~9.0이다. 3' → 5' exonuclease 활성이 없어 9000개 중 1개 빈도로 오류가 발생한다. 3' 말단에 아데닌을 추가하여 A overhang을 형성하므로 TA cloning이 가능하다. 이러한 특성들이 PCR의 효율성과 특이성을 높이는 데 중요한 역할을 한다. 2. Annealing temp...