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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
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PCR을 이용한 유전자 증폭 실험 예비 보고서2025.01.031. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 단백질(표적 핵산)을 증폭해서 검출하는 검사법으로, 두 개의 primer(시발체) 사이에 낀 DNA를 시험관 내에서 대량(20만~50만배)으로 증폭시킬 수 있는 혁명적인 방법입니다. PCR은 DNA의 해리(denaturation), primer와 주형 DNA의 결합(Annealing), DNA의 신장(Extension)의 3단계로 이루어지며, 이를 1 cycle로 하여 2의 제곱으로 증폭됩니다. PCR은 생물의 분류, 의료(유전병 진단), 범죄 수사(DNA 지문 분석) 등 DNA를 취급하는 ...2025.01.03
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Cell harvest and protein assay2025.01.231. Cell harvest 세포 배양 시 adherent cell과 suspension cell로 구분할 수 있으며, adherent cell을 harvest하는 방법에는 화학적 방법(trypsin, accutase 사용)과 물리적 방법(scraper 사용)이 있다. 이번 실험에서는 물리적 방법인 scraper를 사용하여 adherent cell을 harvest하였다. 2. Protein extraction 세포 내 단백질을 추출하기 위해 lysis buffer와 phosphatase/protease inhibitor를 사용하여 ...2025.01.23
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SDS-PAGE를 이용한 AP 단백질 분석 및 Coomassie Blue Staining2025.01.171. SDS-PAGE를 이용한 단백질 분석 SDS-PAGE 실험을 통해 AP 단백질의 크기와 순도를 확인할 수 있었습니다. SDS-PAGE 과정에서 단백질의 3차 구조를 제거하고 크기에 따라 분리되도록 하여, 목표 단백질인 AP 단백질을 선별적으로 확인할 수 있었습니다. 또한 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질 밴드를 시각화하여 분석할 수 있었습니다. 2. 단백질 정제 과정 단백질 정제 과정에서 target 단백질 이외의 비특이적으로 결합한 단백질들이 씻겨나가면서 target 단백질의 순도가 높아지는 것을 확인할 수 있었...2025.01.17
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아주대학교 A+ 생명과학 실험 효소반응2025.01.131. 효소 반응 이번 효소 반응 실험은 온도와 pH에 변화를 주면서 전분 분해효소 아밀라제가 활성화되는 최적의 조건을 찾는 실험을 진행하였다. 효소는 각각 최적의 온도와 pH가 있는데 실험에 사용한 아밀라제의 경우 이론 상 최적의 pH는 6.7~7이고, 알파 아밀라제는 36.5이고 베타 아밀라제는 55~65 이다. 실험 결과 pH와 온도 모두 이론값과 일치하는 것을 알 수 있었다. 다만 85도의 3pH에서도 흡광도가 비교적 큰 값이 나온 것은 실험 과정에서 오류가 발생했을 것으로 추정된다. 2. 아밀라제 아밀라제는 아밀레이스라고도 ...2025.01.13
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식물 세포의 DNA 추출 및 전기 영동2025.01.171. DNA 추출 식물 세포의 DNA를 추출하는 과정을 설명하였습니다. 세포벽, 세포막, 핵막을 파괴하고 DNA와 결합한 단백질을 제거하는 과정을 거쳤습니다. 세제와 소금을 이용하여 세포막과 핵막을 융해하고, 에탄올을 사용하여 DNA를 분리하는 방법을 사용하였습니다. 2. 전기 영동 추출한 DNA를 이용하여 전기 영동 실험을 진행하였습니다. 전기장 내에서 DNA가 크기와 전하에 따라 이동하는 원리를 설명하였습니다. 1X TAE 버퍼, 6X 로딩 버퍼, DNA 래더 등을 사용하여 DNA 밴드를 관찰할 수 있었습니다. 전압 조절에 따른...2025.01.17
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생명과학실험1 단백질 정제 및 기능 분석을 위한 DEAE sepharose anion exchange chromatography2025.01.171. 단백질 정제 이 실험에서는 E.coli에서 추출한 alkaline phosphatase(AP) 단백질을 DEAE sepharose anion exchange chromatography를 이용하여 정제하는 과정을 다루고 있습니다. AP는 E.coli의 outer membrane과 inner membrane 사이에 존재하는 periplasmic space에 위치하며, osmotic shock을 통해 추출할 수 있습니다. 추출된 AP 단백질 혼합물은 열처리, 투석, ion exchange chromatography 등의 과정을 거쳐...2025.01.17
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플라스미드 DNA 준비 및 제한효소 지도 작성2025.11.121. 플라스미드 DNA 준비 플라스미드는 박테리아 세포에서 발견되는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 공학 실험에서 중요한 벡터로 사용됩니다. 플라스미드 DNA 준비 과정은 박테리아 배양, 세포 용해, DNA 추출 및 정제 단계를 포함하며, 순수한 플라스미드 DNA를 얻기 위해 여러 정제 기법이 적용됩니다. 이 과정을 통해 얻은 플라스미드는 분자생물학 연구와 유전자 클로닝에 필수적인 재료입니다. 2. 제한효소 지도 작성 제한효소 지도(Restriction map)는 DNA 분자 위에서 특정 제한효소의 인식 부위와 절단 위치를 나타내...2025.11.12
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아동과학교육의 중요성과 자신의 경험2025.05.071. 아동과학교육의 중요성 아동과학교육은 아이들이 지식을 습득하고 세상을 이해하는 과정에서 매우 중요한 역할을 합니다. 아동기에 과학교육을 받는 것은 아이들이 현대사회에서 요구되는 문제 해결 능력을 갖출 수 있도록 도와줍니다. 또한 과학적 사고와 문제 해결 능력은 아이들의 전반적인 발달에도 긍정적인 영향을 미칩니다. 아동과학교육은 아이들의 호기심과 탐구심을 유발하고, 논리적 사고와 창의성, 협력심을 발전시키는 데 도움을 줍니다. 2. 자신의 과학활동 경험 저는 초등학교 시절 생명과학 실험 활동을 통해 매우 흥미로운 경험을 했습니다....2025.05.07
