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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)2025.01.231. DNA plasmid transfection DNA plasmid transfection 실험의 목적은 고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하는 것이다. 이를 위해 먼저 단백질 A에 대한 염기서열 옆에 epitope tag인 V5 폴리펩타이드에 대한 염기서열을 같이 붙여서 플라스미드 DNA를 세포 내에 넣어준다. 그러면 플라스미드가 핵내에 들어가서 DNA 역할을 할 수 있고, 이후 벡터 DNA가 mRNA로 전사되어 V5가 붙은 단백질 A가 발현된다. 2. Immunopre...2025.01.23
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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
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아주대학교 A+ 생명과학 실험 효소반응2025.01.131. 효소 반응 이번 효소 반응 실험은 온도와 pH에 변화를 주면서 전분 분해효소 아밀라제가 활성화되는 최적의 조건을 찾는 실험을 진행하였다. 효소는 각각 최적의 온도와 pH가 있는데 실험에 사용한 아밀라제의 경우 이론 상 최적의 pH는 6.7~7이고, 알파 아밀라제는 36.5이고 베타 아밀라제는 55~65 이다. 실험 결과 pH와 온도 모두 이론값과 일치하는 것을 알 수 있었다. 다만 85도의 3pH에서도 흡광도가 비교적 큰 값이 나온 것은 실험 과정에서 오류가 발생했을 것으로 추정된다. 2. 아밀라제 아밀라제는 아밀레이스라고도 ...2025.01.13
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아가로스 젤 전기영동 실험 예비 보고서2025.01.061. DNA 및 단백질 분리 이 실험은 전기영동법을 통해 DNA나 단백질과 같은 고분자 물질을 분리하는 방법을 이해하고자 합니다. 아가로스 젤을 만들어 보면서 그 특징을 알아보고, 전기영동에 필요한 시료의 역할과 DNA 분자의 크기에 따른 이동 속도를 관찰합니다. 2. 아가로스 젤 전기영동 원리 DNA는 음전하를 띄고 있어 전기장 아래에서 양극 쪽으로 이동합니다. 이때 DNA 분자량이 클수록, 아가로스 농도가 높을수록, 구조가 복잡할수록 이동 속도가 느려집니다. 전압이 높을수록, 완충액 성분과 이온강도에 따라 이동 속도가 달라집니다...2025.01.06
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아동과학교육의 중요성과 자신의 경험2025.05.071. 아동과학교육의 중요성 아동과학교육은 아이들이 지식을 습득하고 세상을 이해하는 과정에서 매우 중요한 역할을 합니다. 아동기에 과학교육을 받는 것은 아이들이 현대사회에서 요구되는 문제 해결 능력을 갖출 수 있도록 도와줍니다. 또한 과학적 사고와 문제 해결 능력은 아이들의 전반적인 발달에도 긍정적인 영향을 미칩니다. 아동과학교육은 아이들의 호기심과 탐구심을 유발하고, 논리적 사고와 창의성, 협력심을 발전시키는 데 도움을 줍니다. 2. 자신의 과학활동 경험 저는 초등학교 시절 생명과학 실험 활동을 통해 매우 흥미로운 경험을 했습니다....2025.05.07
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Ion Exchange Column Chromatography2025.01.211. Alkaline Phosphatase (AP) Alkaline Phosphatase (AP)는 인산기(phosphate group)을 떼어내는 기능을 하며, alkaline condition에서 활성을 띠는 특징을 가진다. AP는 E. coli의 outer membrane과 inner membrane 사이의 periplasmic space에 존재한다. 2. Protein Purification AP를 정제하기 위해 osmotic shock, centrifuge, dialysis, heat inactivation 등의 과정을 거...2025.01.21
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동식물 세포관찰2025.01.131. 마이크로미터 사용법 광학 현미경, 대물 마이크로미터, 접안 마이크로미터를 이용하여 세포의 크기를 측정하는 방법에 대해 설명하고 있습니다. 대물 마이크로미터 한 눈금이 10마이크로미터이며, 배율에 따라 접안 마이크로미터 한 눈금의 길이가 달라지는 것을 설명하고 있습니다. 2. 동물세포 구조 동물세포의 주요 세포 소기관인 세포핵, 미토콘드리아, 세포막, 리보솜, 내막계(소포체, 골지체, 핵막, 리소좀, 소포, 원형질막) 등의 구조와 기능에 대해 설명하고 있습니다. 3. 식물세포 구조 식물세포만 가지는 세포 소기관인 엽록체와 세포벽...2025.01.13
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생명과학 보고서_SDS-PAGE & Western blot(아주대 전공실험2)2025.05.161. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질을 분자량에 따라 분리하는 기법으로, 단백질 시료에 SDS를 처리하여 단백질의 3차 구조를 풀어 선형화시킨 후 전기영동을 통해 분리한다. SDS는 단백질에 결합하여 음전하를 띠게 하므로, 단백질은 분자량에 비례하여 양극으로 이동하게 된다. 이를 통해 복잡한 단백질 혼합물을 효과적으로 분리할 수 있다. 2. Western blot Western blot은 특정 단백질의 유무 또는 양을 확인하는 분석 방법이다. 전기영동으로 분리된 단백질을 membrane에 전이시킨 후, 표적 단백질에 특이적...2025.05.16
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미생물 배양 배지 만들기, 배양 및 관찰2025.01.031. 미생물 미생물은 매우 작아서 눈에 보이지 않는 아주 작은 생물로, 원생생물, 세균, 곰팡이, 바이러스 등을 포함하며 유전적, 생리적, 생화학적, 생태학적으로 다양성을 보인다. 미생물은 원핵미생물과 진핵미생물로 나뉘며, 원핵미생물은 핵막이 없고 핵산이 세포질 내에 존재하는 단세포 생물이고, 진핵미생물은 막으로 둘러싸인 핵을 가진 곰팡이나 효모 등이 포함된다. 2. 배양 미생물의 특징을 알아내거나 증식을 위해 미생물을 배양하는데, 배양이란 미생물을 온도, 산소 등 적당한 조건에서 증식시키는 과정이며 액체배양과 고체배양이 있다. 배...2025.01.03
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