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소개

HPLC에 대한 전반적인 내용입니다.

목차

☀ Chromatography의 정의
☀ Chromatography의 분류
☀ HPLC 란 ?
☀ HPLC 구성

본문내용

☀ Chromatography의 정의
- Chromos(color) + graphein(write) = 색층분석법
- 어떠한 물질을 두 상에 대한 친화력차이를 이용하여 혼합물 중에서 단일성분으로 분리하는 과정.
- 혼합된 시료성분이 이동상과 고정상 사이를 흐르면서 흡착, 분배, 이온교환 또는 분자크기 배재작용 등에 의해 각각의 단일 성분으로 분리되는 것.
- 분리, 정성, 정량 등의 분석목적과 분리, 정제, 분취 목적에 이용.

☀ HPLC 란 ?
- 물질은 크게 극성, 무극성, 이온성을 가진 물질들로 나눌 수 있는데, 이 물질들 간의 친화력을 이용하여 혼합물을 단일 성분으로 분리하여 분석하는 장치.
- 원리
: Column속에 고정상을 부착시키고 그 속에 액상인 이동상과 분석을 필요로 하는 물질을 혼합하여 column속에 일정한 압력으로 흘려보낸다.
: 고정상과 친화력이 있는 물질은 column을 나오는 시간이 오래 걸리는데 이러한 시간차이를 이용해서 시료를 분석한다.
중략..

- Detector
: column에서 분리되어 검출기의 cell을 통과하는 이동상과 분석성분들을 일정한 시간 간격을 두고 일정한 기작에 의해 측정하여 전기적 신호로 바꿔주는 장치.
: 검출기를 통과한 시료의 양에 따라 전기적 신호의 크기가 달라짐.
이 시료의 크기로 시료 정량 분석.
: Detector 구비 요건
① Signal to noise ratio (S/N ratio) 가 높을 것
② Noise , Drift 가 적을 것
③ Detection limit 가 낮을 것
④ Flow rate , temperature , pressure 에 안정할 것
⑤ Gradient 가 가능할 것
⑥ 사용 목적에 따라 선택성이 있을 것

- Mobile phase
: 역상 HPLC에서 가장 중요한 인자.
: 이동상이 화합물의 체류시간에 영향을 주므로 적절한 선택이 필요.
: 이동상은 시료를 칼럼 속으로 통과하도록 해준다. (HPLC용은 순도가 높아야 함).
: 일반적으로 acetonitrile, Methanol, H2O 이 사용됨

참고자료

· 없음