Bacterial Transposon (mini-prep을 이용한)

소개

미생물 유전학 실험 레포트

목차

Abstract
Introduction
Material
Method
Results
Discussion
References

본문내용

Abstract
Transposon 현상을 관찰하기 위하여 E. coli와 Tn3HoHo1이라는 transposon을 이용하였다. E. coli 및 그 안의 plasmid와 Tn3HoHo1이 특정 항생제에 내성을 가지도록 조작한다면 transposition이 일어났을 경우 이 항생제들 모두에 내성을 가지게 되어 screening이 가능함을 이용한다. 본 실험에서는 암피실린, 카나마이신, 날리딕산의 항생제를 사용하였다. screening을 거쳐 생존한 콜로니들은 transposition이 일어났음을 의미한다. 여기에 Xgal 처리를 하여 색으로서 β-galactosidase가 생성되었는지(Tn3HoHo1내의 lac Z gene의 발현이 되었는지) 확인할 수 있다. transposition이 일어났더라도 Tn3HoHo1내의 lac Z gene은 자체 promoter가 없기 때문에 E. coli plasmid의 promoter가 적당한 위치에 있어야만 발현이 가능한 것이다. 이와 함께 콜로니로부터 mini-prep을 거쳐 plasmid DNA를 얻어내 제한효소 처리 뒤 전기영동 시켜 밴드의 크기를 관찰함으로서 어느 위치에 insertion이 일어났는지 확실히 알 수 있게 된다.

Introduction
Transposon은 한 세포의 genome의 여러 장소로 돌아다니는 DNA 조각이다. 돌아다니는 과정에서 돌연변이가 생기거나 genome의 양이 감소하거나 증가하게 된다. 이러한 이동성 DNA를 도약 유전자라고도 부른다. 이 유전자는 크게 DNA transposon과 retrotransposon의 두 가지로 나눌 수 있다. transposon은 한 장소에서 다른 장소로 직접 움직이는 DNA로

참고자료

· 위키피디아(웹), plasmid 참조