그람 염색

소개

<실험목적>
실험을 통해 그람 염색에 의한 세균 감별 염색(differential stain) 방법을 익히고, 세균의 Gram 양성(보라색) 및 음성(적색)에 따른 분류와 염색성의 원리, 방법, 기본 지식을 이해할 수 있게 한다.

목차

1. 그람 염색법 (Gram`s staining)
2. 그람염색의 원리
3. 염색법의 종류
4. 세균의 분류
5. 그람 양성균 (Gram positive bacillus)
6. 그람음성균 (Gram negative bacillus)
7. 그람양성균과 음성균의 차이
8. Staining mechanism
<실험 설계>

본문내용

<실험목적>

실험을 통해 그람 염색에 의한 세균 감별 염색(differential stain) 방법을 익히고, 세균의 Gram 양성(보라색) 및 음성(적색)에 따른 분류와 염색성의 원리, 방법, 기본 지식을 이해할 수 있게 한다.


<실험 이론>

1. 그람 염색법 (Gram`s staining)

덴마크의 세균학자 Christian Gram은 1884년 Gram 염색법에 의하여 세균을 크게 Gram 양성균과 Gram 음성균으로 분류했다.
Gram 염색의 주된 원리는 확실히 밝혀지지 않았지만 현재 가장 일반화된 이론은 Gram 양성균의 세포벽에는 Magnesium ribonuclate라는 산성물질이 있어 염기성 염료인 crystal violet와 결합하여 알코올에 탈색되지 않고 자색(violet color)으로 염색되고 그람 음성균의 세포벽에는 magnesium ribonuclate가 없어 탈색제인 알코올에 의해 탈색된 후 대조 염색인 safranin O에 의해 적색으로 염색된다.
그람 요오드 용액은 매염제로 사용되며 crystal violet이 magnesium ribonuclate와의 결합을 촉진시켜주는 역할을 한다. 그람 염색과 같은 감별 염색방법은 세균학적 측면에서 매우 중요한 기술 중의 하나이다.
분별 염색법으로 가장 널리 이용되는 방법이며, 그람 염색반응은 계통발생학적으로 서로 유연이 있는 균종들 사이에 여러 가지 형태학적 특성과 서로 긴밀한 관련이 있으므로 세균 분류의 지표가 된다. 이 염색법은 기술이 미숙하면 그릇된 판정을 내리기 쉬우므로 숙련될 때까지 많은 연습이 필요하다.
또 유아기 배양균(young culture)은 염색성이 좋으나 노쇄기 배양균(old culture)은 염색성이 좋지 않아서 그람 양성균이 음성균 같이 보일 때가 많으므로 주의해야 한다.
그람 양성균은 염색한 세균을 알코올 같은 탈색제로 탈색해도 크리스탈 바이올렛 또는 메틸 바이올렛-요오드 복합물이 세포속에 그대로 머물러 있게 된다. 그 반대로 그람 음성균은 염색한 후 알코올에 의해 완전히 탈색된다.

참고자료

· "일반생명공학 및 실험“, 동아대학교
· "화공생명기초실험”, 고려대학교
· 미생물학 실험/한국미생물학회-아카데미 서적