Plasmid / DNA 분리정제

소개

직접 레포트를 쓴 자료이기에 수정 및 편집이 필요없습니다.

목차

1. 목 적
2. 이 론
▶ Plasmid 란?
▶ 형질전환이란?
▶ 유전자 재조합이란?
▶ Competent cell 이란?
※Competent cell 의 제조방법
※Competent cell strain
▶ Plasmid DNA의 분리정제
Total cell DNA의 분리
세균 배양물의 증식 및 수확
세포 추출물의 분리
세포 추출물로부터 DNA의 정제
DNA 샘플의 농축
DNA 농도의 측정
세균 이외의 생물체로부터의 total cell DNA의 분리
플라스미드 DNA의 분리
플라스미드 증폭
3. 재료 및 기구
4. 실험 방법
- Transformation
- Plasmid DNA 분리
- 아가로스 겔 전기영동

본문내용

1. 목 적
미생물에서 plasmid DNA를 분리하고 전기 영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다. plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질 전환을 선별하는 기술까지 공부하는데 필수적인 실험기술을 습득한다.

2. 이 론
▶ Plasmid 란?

Plasmid란 세포 내에서 발견되는 염색체외 DNA 분자로서 독립적 복제 능력을 가지는 유전인자들의 집합체로, F Plasmid와 R Plasmid가 대표적인 예이다.
다양한 종류의 Plasmid들이 여러 다른 세균들로부터 발견되었는데, 이들은 예외 없이 환상의 2중 나선 DNA 분자들이다. 이들 다양한 Plasmid 가운데서 의학적으로 중요한 RPlasmid와 분자생물학 연구에 크게 기여한 F Plasmid가 1950년경에 발견되었고 그동안 이들에 대한 많은 연구가 이루어졌다. Plasmid의 유전인자들은 세균 세포 생존에 필요한 1차적 유전형질 외에 다양한 환경에서 적응력을 가지고 살아가는데 필요한 2차적 형질을 부여하는 것들이 많으며, 환경의 다양성만큼이나 아직도 발견되지 않은 Plasmid들이 많이 있을 것으로 추측되고 있다. Plasmid는 파지와 더불어 분자생물학, 분자유전학 연구에 필수적 도구로 쓰여 왔는데 실제에 있어 Plasmid와 파지는 대단히 밀접한 관련이 있다. 세포 내에 존재하는 이들 독립적인 DNA 분자들은 공생과 기생관계로 구별할 수도 있겠으나, J. Ledberg는 공생 분자로서의 Plasmid와 기생분자로서의 파지의 구분은 숙주세포의 제한된 측면에 대한 관측자의 주관적 견해에 의하는 것이라는 점을 지적하고 있다.
Plasmid 연구는 의학과 농학 분야에서 특히 중요성을 띄는데 이는 Plasmid 유전자들이 사람과 동물의 병원균에 대해 항생제 내성을 갖게 할 뿐만 아니라 이들 병원균들의 병원성을 증가시키는데 관여하는 것으로 알려져 있기 때문이다. 또한 농학 분야에서는 대기질소 고정에 관여하는 여러 가지 효소들이 Plasmid 유전자들에 의해 만들어지며, 또 항생제 생성에 관여하는 유전자들도

참고자료

· 없음