[혈구계산]Percoll실험 및 정자 카운팅(Counting)

최초 등록일
2006.06.09
최종 저작일
2006.06
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직접 실험한 보고서입니다.

목차

실험과정
결과
고찰

본문내용

- 정액 채취
① -196도의 반보존적으로 보존되어있는 액체질소탱크에서 정자가 들어있는 스트로를 꺼내서 상온 30도의 온수에서 융해한다.
② 스트로의 구멍이 보이게 잘라내고 위에있는 두 칸 아래부분을 자른 후, 통채로 다 빼면서 정액이 나오도록 입으로 훅 불어낸다.- 원심분리
① 정액을 Percoll에 넣어서 1,800rpm에 12분을 돌린다.
② 밑에 하얀부분(정자)이 이면 이 부분만 제외하고 마이크로피펫으로 노란 부분을 제거한다.
③ SBO(클리너)를 3mml정도 넣어 1,500rpm에 3분을 돌린다.
④ 다시 꺼내서 정자부분을 빼고 다 제거하고
다시 SBO를 넣어 클린한다.(세척을 두번한다.)
⑤ 정자부분을 제외한 나머지부분을 제거한 후 FBO로 희석한다.

- 혈구계산
① 혈구계산판과 커버글라스 사이에 피펫의 정액(10㎕)을 한두 방울을 떨구어 계산판의 눈금 내에 (높이10㎛) 정액이 스며들게 한다.
② 혈구계산판에서 25구획의 정자 수를 모두 세었을 때 그 수에다 100만을 곱하면 그 정액의 ㎖당 정자수가 된다.

계산법:
정자 수 (㎖당) = 혈구계산판 내의 총 정자 수 x 희석배율 x 1㎣로 환산 x 1㎖로 환산

참고 자료

없음

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