[분리정제]GPC에 의한 hemoglobin과 Lysine의 분획

소개

분리정제 기기분석을 듣는 대학생 참고바람...

목차

1. Theme
2. Date
3. Name & Coworker :
4. Abstract :
5. Principle :
6. Method :
7. Result :
8. Discussion :
9. Reference :

본문내용

(1) 겔[gel]
콜로이드용액(졸)이 일정한 농도 이상으로 진해져서 튼튼한 그물조직이 형성되어 굳어진 것으로 이 현상을 겔화라 한다. 한천(寒天) ·두부 ·실리카겔 등이 그 예이다. 이들은 콜로이드입자의 그물조직 사이에 용매인 물 등이 들어가 굳어버린 것이며, 다시 온도를 올려 주면 분자운동이나 그 밖의 원인에 의하여 조직이 파괴되어 다시 유동성 액체로 된다.
그물조직 사이에 물이 들어 있는 겔을 히드로겔이라고 하며, 겔의 그물조직 사이에서 용매가 제거되고 공기가 들어간 모양의 다공성(多孔性) 겔을 크세로겔이라고 한다.
규조토(硅藻土) ·산성백토(酸性白土) 등이 그 예이다. 이들은 흡착제로서 널리 이용된다.
(4) 겔 크로마토그래피 (gel chromatography)

겔 크로마토그래피는 겔 여과(gel filtration) 또는 겔 침투(gel permeation) 크로마토그래피라고한다. 겔 여과 크로마토그래피(이동상은 물)라는 명칭은 생화학자들에 의해 사용되며, 겔 침투 크로마토그래피(이동상은 유기용매)라는 명칭은 고분자화학자가 사용한다. 겔 크로마토그래피는 정지상에 분자체(molecular sieve)를 사용하는데 이들은 세파덱스(Sephadex), 폴리아크릴아마이드(polyacrylamide) 또는 아가로오스(agarose) 겔로서 친수성이므로 물을 흡수할 수 있고 팽윤된다(그림 10-4).
시료 분자의 크기가 팽윤된 겔의 최대 구멍(pore)보다 클 때는, 그 분자는 겔 입자를 통과하지 못하므로 정지상 입자의 공간을 통해서 컬럼 밖으로 나온다. 보다 작은 분자는 겔 입자의 열린 구멍 속에 들어가나 그 크기와 모양에 따라서 통과하는 속도가 다르다. 그러므로 분자의 크기가 감소하는 순서로 용출된다.
(5) 겔 크로마토그래피 겔 베드(gel bed)의 총부피 식
겔 크로마토그래피에서 겔 베드(gel bed)의 총부피는 다음과 같은 식으로 표시된다(그림 10-5).
보이드 부피인 Vo는 겔 분자체 주위에 있는 용매가 차지하는 공간으로 일반적으로 겔 베드 총부피(Vt)의 약 35%가 된다. 대부분의 컬럼은 염료(dye)인 blue dextran (분자량 2 × 106 dalton)으로 Vo를 보정(calibration)한다. 용리 부피(elution volume)인 Ve는 시료 분자가 컬럼을 지나서 밖으로 나올 때 까지 용리액의 양을 의미한다. 그리고 시료 분자의 지연정도는 다음과 같은 식으로 표현된다.

REV = Ve/Vo (10-5)
R = = Vo/Ve (10-6)
Kav = (Ve-Vo)/Vx (10-7)

참고자료

· http://100.naver.com/100.php?id=57328
· http://www.cheric.org/ippage/e/ipdata/2001/12/file/e
· 기기를 이용하는 화학실험법 DonaldT.Sawyer 외 2명 탐구당 1985.3.30 p.388
· 기기분석의 원리와 응용 박면용 녹문당 2000.8.25 p.370