Bovine Serum Albumin의 단백질 풀림(Protein Unfolding)

소개

"Bovine Serum Albumin의 단백질 풀림(Protein Unfolding)"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 방법
3. 실험 결과
4. 고찰
5. 실험보고서
6. 참고문헌

본문내용

실험 목적
- Bovine serum albumin의 단백질 풀림을 통하여 BSA의 안정도를 결정한다.

실험 방법
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*** 다음 용액들을 제조할 것 ***
● 100 mM phosphate buffer 용액 (pH 7.4) 500 mL (500 mL 부피 플라스크에 Na2HPO4 1.150 g과 NaH2PO4․H2O 0.262 g을 넣고 초순수 증류수 400 mL로 용해시킨다. 눈금까지 초순수 증류수로 채운다. pH ~ 7.4 인지 확인한다.)
● 0.1 mM bovine serum albumin (BSA) 저장용액 in phosphate buffer 10 mL (깨끗한 Vial 병에 phosphate buffer 용액 10.0 mL을 가하고 얼음에서 냉각시킨다. BSA 66.5 mg을 차갑게 한 buffer 용액 표면에 조심스럽게 흩뿌린다. Buffer 용액이 BSA를 적시도록 10 ~ 15 분 정도 기다린 후, BSA가 균일하게 분포되도록 용액을 천천히 섞는다. (강하게 교반하거나 흔들지 않는다.) BSA 용 액은 차갑게 보관한다.)
● 9 M urea 저장용액 in phosphate buffer 120 mL

Part I: BSA 용액의 흡수 스펙트럼
1. 0.1 mM BSA 저장 용액을 phosphate buffer 용액으로 묽혀서 10 μM BSA 용액을 준비한다. Reference(blank)는 phosphate buffer 용액을 사용한다.
2. UV/Vis 분광광도계에서 quartz 큐벳을 사용하여 10 μM BSA 용액의 흡수 스펙 트럼을 얻는다. (파장 범위 220 ~ 400 nm)
3. 스펙트럼은 *.txt 파일로 저장한다

참고자료

· 이공학도를 위한 물리화학/자유아카데미/R.chang and Jonh W, Toman, Jr 외 5명