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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DEAE sepharose anion exchange chromatography)

"이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DEAE sepharose anion exchange chromatography)"에 대한 내용입니다.
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최초등록일 2024.10.03 최종저작일 2024.03
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DEAE sepharose anion exchange chromatography)
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    소개

    "이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DEAE sepharose anion exchange chromatography)"에 대한 내용입니다.

    목차

    1.실험 날짜
    2.주제
    3.실험 목표
    4.Introduction
    5. 실험도구
    6. 실험방법
    7. Discussion

    본문내용

    1.실험 날짜: 2024.03.20
    2.주제: DEAE sepharose anion exchange chromatography
    3.실험 목표:Alkaline phosphatase (AP)의 특성을 이해하고DEAE sepharose anion exchange chromatography를 통해 AP를 정제한다.
    4.Introduction
    1.column chromatography의 원리
    크로마토그래피는 주어진 시료 중 정량 분석하고자 하는 성분을 분리하고 확인하는 수단으로 여러 다른 화합물들이 상이한 두 가지 phases 간에 분포되어 있거나 어느 물질 내의 분리 가능한 부위들 사이에 분포되어 있을 때 그 분포된 정도가 화합물들끼리 서로 다르다는 사실에 기초한 방법이다. 한 가지 상은 정지상(stationary phase)이고 다른 상은 이동상(mobile phase)이다. 이동상은 정지상을 일고 있는 물질 위로 흐르는데, 분리될 시료는 이 이동상을 따라 운반된다. 시료 중의 여러 성분이 이동상과 고정상을 흐르면서 흡착, 분배, 이온 교환 또는 분자 크기 등의 차이로 분리되는 것을 말한다. 분리, 정성, 정량 등의 분석과 분리, 정제, 분취 목적에 이용된다.
    시료의 구성성분들은 정지상과 상호작용을 하는데 그 상호작용의 정도가 다르다. 정지상과 비교적 강하게 상호작용하는 성분은, 약하게 상호작용하는 성분에 비해서 이동상에 의해 운반되는 속도가 느리다. 성분들의 이동성의 차이가 분리의 기본 원리이다.

    단백질 연구에 사용되는 수많은 크로마토그래피 기술들은 칼럼 크로마토그래피 형태인데, 이는 정지상을 이루는 물질을 칼럼에 채워 사용하는 방법이다. 시료를 가할 때에는 소량의 농축액으로 만들어 칼럼의 맨 위에 가한다.

    참고자료

    · 네이버 생화학백과
    · 생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 강영희
    · Alkaline phosphatase
    · http://en.wikipedia.org/wiki/Alkaline_phosphatase(WIKIPEDIA-Alkaline phosphatase,2012/03/21)http://www.riss.kr/search/detail/DetailView.do?control_no=c24b07ec1f342b4bffe0bdc3ef48d419&p_mat_type=1a0202e37d52c72d&p_submat_type=&fulltext_kind=&t_gubun=&convertFlag=Y&naverYN=&colName=re_a_kor&DDODFlag=&loginFlag=#redirect (RISS, 2012/03/21)
    · Protein purification, ion exchange chromatography, column chromatography의 원리생화학 8판(2018). 곽한식·김재원·김하근·태건식.라이프사이언스
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      Ai 리뷰
      실험 과정에서 단백질의 온도 민감성, 비드의 기능성 유지, 비드 packing 등의 주의사항을 숙지하고 이온교환 크로마토그래피의 원리를 이해하여 AP 분리에 성공했다. 추가로 비드 재사용을 위한 regeneration 과정에 대해 학습했다.
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