[일반생물학실험]분광광도법

목차

1. 실험목적
2. 실험이론 및 원리
3. 실험기구 및 시약
4. 실험방법
5. 주의사항
6. 실험결과

본문내용

1. 실험 목적
가. 분광 광도법을 이해하고 Lambert-Beer법칙을 학습한다.
나. 고도 산화법의 일종인 광촉매 반응을 통해 반응속도를 측정한다.

2. 실험 이론 및 원리
가. 분광 광도법
빛의 스펙트럼을 이용하여 각 파장에 대한 빛에너지의 분포를 조사하기 위해 빛을 분광기를 이용하여 단색광으로 나누고, 그 세기를 측정하는 방법이다.
1) 원자흡수 분광법 (Atomic Absorption Spectrometry : AAS)
이온과 분자가 전자기 복사선을 흡수하는 성질을 이용하여 물질을 분석하는 방법을 흡수분광법이라고 한다. 흡수분광법을 이용하여 물질을 정성분석 또는 정량분석 하거나 분자의 에너지는 여러 가지 형태의 에너지의 합이며 이는 다음과 같이 나타낸다.
따라서 분자가 빛 에너지를 흡수할 경우 분자의 에너지가 증가되며 흡수 화학종의 에너지는 광자의 진동수에 비례해서 증가한다.

2) 분광광도계 구조
광원 : 자외선/가시광선 영역에서 광원은 텅스텐 램프를 사용한다.
단색화 장치 : 특정한 영역의 파장만 통과시킨다. 회절발 단색장치와 프리즘 단색장치가 있다.
시료부 : 유리, 플라스틱 재질의 사각형모양, 흡수셀의 표준 두께 10mm 사용후 이온 교환수로 세척해 주어야 한다.
검출계 : PMT(Phto Multiplier Tube) 미약한 신호를 감지하여 증폭시켜 검출기로 보내는 역할 Photodiode는 빛에너지를 전기 에너지로 변환하는 광센서의 한 종류 이며 빛의 세기를 정확하게 측정하기 위해 활용된다.

4) 분광광도계 사용법
① 분광광도계의 전원을 켜서 60분정도 예열한다.
② 플라스틱 셀에 각각 메틸렌블루용액과 증류수를 넣는다.
③ 증류수를 먼저 분광광도계에 ‘베이스’ 칸에 넣고 작동시킨다.
④ 샘플로 만들어 놓은 2,4,6,8,10 ppm 의 메틸렌블루 용액을 ppm 순서대로 넣어준다.
⑤ 측정이 끝난 셀들을 다 제거한 후, 증류수를 다시 베이스로 잡는다.
⑥ UV-lamp 에 돌린 용액들을 추출한 순서대로 기계에 넣어준 뒤, 작동시킨다.

참고자료

· 없음