인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 8. Polyethylenimine (PEI)을 이용한 siRNA 응축과 나노 입자 형성

소개

✔ 인천대학교 나노바이오실험(2) '8. Polyethylenimine (PEI)을 이용한 siRNA 응축과 나노 입자 형성' 자료입니다.
✔ 엑셀 계산을 완료한 창을 스크린샷하여 레포트 마지막에 첨부하였습니다.
✔ 나노바이오실험(2) 과목은 23년 2학기에 A+를 받았고, 해당 레포트 점수는 10점 만점에 9점 이었습니다.
✔ 표절률에 문제가 될 수 있으니 자료를 그대로 제출하지 마시고, 참고 용도로 사용하시길 바랍니다.
✔ 실험은 학기마다 약간씩 다르게 진행하기 때문에, 실험 수업에서 알려준 작성 필수 요소에 맞추어 작성하시고, 부가적으로 참고하시는 것을 추천드립니다. 제 답안 또한 오류가 있을 수 있고, 수업마다 채점 기준 또한 다르니 순수 정답 보다는 과정을 위주로 확인하시면 충분히 도움 될 것 같습니다.

목차

1. Abstract

2. Introduction

3. Materials & Methods

4. Results
1) 각 N/P ratio에 따른 크기 및 zeta-potential 값을 비교하고 어떤 경향성이 있는지 찾아보시오.
2) 저분자량 PEI와 고분자량 PEI를 사용하였을 때 나노입자의 크기를 비교하시오.

5. Discussions
1) siRNA의 작용원리에 대해 조사하여 introduction에 쓰시오.
2) N/P ratio, PEI 분자량이 siRNA/PEI 나노복합체에 어떤 영향을 주는지 찾아보시오. (크기 및 표면 전하 외에도 영향을 받는 다른 것이 있으면 찾아보아라.)
3) 상용화된 양이온성 유전자 전달용 고분자에 대해 좀 더 조사하라.

6. References

본문내용

이번 실험에서는 대표적인 유전자 전달용 양이온성 고분자인 polyethylenimine (PEI)을 이용해 siRNA/PEI 나노입자를 만들고, DLS와 zeta potential 측정을 통해 결과를 확인해보았다. 또한 저분자량 (low molecular weight 0.8 kDa) PEI와 고분자량 (high molecular weight 25 kDa) PEI를 사용하였을 때의 나노입자 크기의 차이를 비교해보았다. 실험 결과 N/P ratio가 5, 10, 20으로 증가함에 따라, 0.8 kDa의 siRNA/PEI 나노 복합체의 크기는 각각 303.8 d.nm, 677.4 d.nm, 452.8 d.nm였다. 25 kDa의 경우, siRNA/PEI 나노 복합체의 크기는 각각 383.4 d.nm, 677.4 d.nm, 452.8 d.nm였다. 두 결과 모두 특정한 경향성을 찾을 수 없었다. 하지만 이론적인 결과는 N/P ratio가 증가함에 따라 나노입자의 크기는 감소해야 한다. 다음으로 N/P ratio가 5, 10, 20으로 증가함에 따라, 0.8 kDa의 siRNA/PEI 나노 복합체의 zeta-potential은 각각 -0.676 mV, 0.079 mV, 6.001 mV였다. 25 kDa의 경우, siRNA/PEI 나노 복합체의 zeta-potential은 각각 9.33 mV, 11.8 mV, 4.74 mV였다. 두 결과 모두 Free-siRNA의 zeta-potential이 -8.03 mV인 것에 비해 대체적으로 양전하가 증가하는 경향성을 보였다. 마지막으로 모든 N/P ratio에서 저분자량과 고분자량 PEI를 사용한 나노 복합체의 크기를 비교하였을 때, 대체적으로 저분자량 PEI를 사용했을 때가 고분자량 PEI를 사용했을 때보다 나노 입자의 크기가 더 컸다.

참고자료

· Harris 분석화학, 제 10판, 자유아카데미, Daniel C. Harris
· 생명과학대사전, 2008, 아카데미서적
· RNA 간섭현상 : https://www.umassmed.edu/rti/biology/rna/how-rnai-works/