갑각류 DNA 추출 실험 보고서 (A 받음)

목차

1. 실험 제목
2. 실험 목표
3. 실험 원리
4. 실험 과정
5. 고찰
6. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 제목 : 갑각류 DNA 추출 실험

2. 실험 목적
(1) 해양생물과 유전자 분석에 대한 이해도를 향상한다.
(2) 유전자 분석을 통한 실제 유전 서열 구조와 분석에 대한 이해도를 향상한다.

3. 실험 원리
(1) PCR
캐리 멀리스(Kary B. Mullis)에 의하여 1985년에 개발된 중합효소 연쇄 반응(polymerase chain reaction, PCR)은 현재 유전물질을 조작하여 실험하는 거의 모든 과정에 사용하고 있는 검사법으로, 검출을 원하는 특정 표적 유전물질을 증폭하는 방법이다. 중합효소 연쇄 반응에 의해, 소량의 유전물질로부터 염기 순서가 동일한 유전물질을 많은 양으로 증폭할 수 있으므로, 인간의 DNA를 증폭하여 여러 종류의 유전질환을 진단하는 데 사용된다. 또한 세균이나 바이러스, 진균의 DNA에 적용하여 감염성 질환의 진단 등에 사용할 수 있다. 중합효소 연쇄 반응을 위하여 필요한 물질은 증폭하고자 하는 주형이 되는 DNA와 시발체, DNA 중합효소, dNTP, 완충액, 염화마그네슘(MgCl2)이다. 주형이 되는 DNA로는 보통 20~100ng의 DNA를 사용하며, 시발체는 보통 20~30개의 염기로 이루어지도록 디자인하며 A, T와 G, C의 비율은 동일한 비로 이루어진 것이 좋다. 또한 G, C의 분포는 몰려 있지 않는 것을 사용하여야 한다.
또한 시발체 내와 시발체 간에 상보적인 염기 서열이 존재하지 않도록 하여야 한다. DNA 중합효소는 90℃ 이상의 고온에서도 활성을 잃지 않는 효소를 사용하며, DNA의 5’에서 3’으로 합성하는 기능, 3’에서 5’으로 잘못된 염기를 교정하는 능력을 가지고 있다. dNTP는 dATP, dCTP, dGTP, dTTP로 구성되며 보통 200 μM의 농도를 사용한다. 또한 DNA 중합효소가 작용하고 dNTP와 시발체가 결합하기 위하여 Mg2+가 필요하다.

참고 자료

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