분자유전학실험레포트(A+) Protein extraction and Quantitative analysis and SDS-PAGE. 단백질 정량을 통한 단백질 sample의 농도 추정 및 SDS-PAGE의 staining결과 패턴 분석(BSA 희석배수에 따른 O.D.값과 단백질 농도 그래프有, staining한 사진有). protein 염색법.

소개

"분자유전학실험레포트(A+)_Protein extraction and Quantitative analysis and SDS-PAGE. 단백질 정량을 통한 단백질 sample의 농도 추정 및 SDS-PAGE의 staining결과 패턴 분석(BSA 희석배수에 따른 O.D.값과 단백질 농도 그래프有, staining한 사진有). protein 염색법."에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. Abstract
Ⅱ. Introduction
Ⅲ. Materials
Ⅳ. Chemical reagent & apparatus
Ⅴ. Methods
Ⅵ. Results
Ⅶ. Discussion
Ⅷ. References

본문내용

Ⅰ. Abstract
본 실험은 단백질 정량을 통하여 단백질 sample의 농도를 추정하고 SDS-PAGE의 running 후 staining결과를 해석하는 목적으로 진행하였다. 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/64배로 희석한 단백질 sample의 595nm에서의 O.D값을 측정하고 단백질 희석배수와 비교하여 standard curve를 작성한 후 각 조의 sample 농도를 추정하였다. SDS-PAGE loading에 이용할 시료는 단백질의 양을 10μg으로 정량하고, sample buffer와 extraction buffer를 사용하여 total volume을 25μl로 하여 사용하였다. 실험 결과 1조 lane의 모든 band가 다른 lane에 비하여 흐릿하게 나타났고 1조 lane에는 17.7kDa으로 추정되는 위치에서 band가 형성되지 않았다. 다른 조의 경우 10kDa부터 130kDa까지 여러 위치에서 band가 나타났으며 Hsp17.7로 추정되는 15kDa과 25kDa사이에 위치한 band가 형성되었다. 또한 band의 진하기는 위치에 따라 차이를 보였다. 단백질 sample의 농도가 낮았던 1조의 staining결과 band가 흐릿하게 나타난 것으로 단백질 sample의 농도가 결과에 영향을 미치고, 여러 크기의 단백질이 동시에 발현됨을 알 수 있다. 본 실험을 통하여 단백질 농도 추정에 필요한 단백질 정량과정에 대한
이해와 단백질 발현 실험을 위해 단백질 정량 분석이 필요함을 알 수 있다.

Ⅱ. Introduction
1. 단백질 기능
단백질은 생명체의 주요 성분이며 세포에 필수적인 광범위한 기능을 수행한다. DNA는 정보 분자인데 반하여 단백질은 모든 세포에서 작업을 수행한다. 단백질은 신진 대사 활동을 조절하는 생화학 반응을 촉진하고 세포와 생물의 구조적 안정성을 유지한다. 단백질은 그들의 생물학적 기능을 포함한 다양한 방법으로 분류 될 수 있다.

참고자료

· ung-Kap Choi·Gyurng-Soo Yoo, Fast protein staining in sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel using counter ion-dyes, coomassie brilliant blue R-250 and neutral red, October 2002, Volume 25, Issue 5, pp 704-708
· 단백질 염색법
· 김현경·이남혁·김윤지·오세욱·홍상필·조진호, 단백질의 생화학적인 특성을 이용한 Vibrio parahaemolyticus (KCTC 2471), Bacillus cereus (KFRI 00437)의 정량법, 2005 International symposium and annual meeting, 2005.10, pp.427-428
· 단백질 정량 분석