[인천대 생명공학실험1 A+] 미생물 유래 기능성 정량분석2 실험결과 보고서

소개

A+를 쉽게 받을 수 있도록 매우 정리가 잘 되어 있는 대장균, 세포의 생장곡선 실험결과 보고서 입니다.
Lowry method, TSA,TSB,Yeast extract, Blank(B용액), tyrosine standard curve, Unit(효소량), TCA와 0.2µm Filter, ANOVA, T-test, a-glucosidase inhibitor(AGI)에 대한 이론을 포함하고 있습니다.
이론 외에 실험결과와 오차의 원인까지 포함한 고찰 및 결론 또한 체계적으로 꼼꼼히 적혀있습니다.

목차

1. Abstract
2. Information
3. Materials and Methods
4. Result
5. Discussion
6. Conclusion
7. Reference

본문내용

Protease colorimetrically method :TSA 배지에 균주를 streaking 하고, 37℃에서 24시간 배양후 5 ml TSB 배지에 균주를 접종하고 37℃에서 48시간동안 배양(180 rpm)함. 13,000 rpm, 15분, 4℃ 후 상등액을 2개 하고 (A) 상등액(100 μl) + 0.6% casein (300 μl) + 0.05M sodium phosphate buffer (200 μl)을 넣고 37℃에서 30분간 배양함. 0.4M TCA (600 μl)를 처리하여 반응을 중단 후 30분간 대기. (B) 상등액(100 μl) + 0.6% casein (300 μl) + 0.05M sodium phosphate buffer (200 μl) + 0.4 M TCA (600 μl)를 넣어 바로 반응을 중단 후 30분간 대기. 각각의 반응액을 0.2 μm filter 로 여과 시키고 EP tube에 여과액(200 μl)과 0.4 M Na2CO3 (200 μl), 1 N folin 시약을 200 μl 첨가하고 vortexing한 뒤, 40℃ 에서 30분간 반응하며 96 well plate에 200 μl씩 sample을 넣고 흡광도(OD660 )를 측정.
Tyrosine standard curve 제작:1 N HCl 용액에 녹여서 사용하고 D.W.로 희석하여 사용. Pre-stock (2 mg/ml) 10 ml을 제조하여 X1/20 희 석 한 (50 μg/950 μl) 것 을 stock (100 μg/ml)으로 사용. 200 μl씩 tyrosine (0, 5, 7.5, 10, 15, 20, 30 μg/ml) + 0.4 M Na2CO3 + 1 N folin 시약을 EP tube에 넣음. 40℃에서 30분간 배양한 뒤, 660 nm에서 흡광도를 측정.

참고자료

· JAMES G. et al., Microbiology a laboratory manual 6th, PEARSON p.215-218, 134 135
· Michael T. et al., Brock의 미생물학 11th, PEARSON 402-403
· Dean R. et al., 생화학 개념과 응용(2017), 라이프사이언스, p204,205
· 민철기 et al., 생 물학실험서 2 nd edition(2006), 라이프사이언스 , 31 36p