cell culture & immunocytochemistry

목차

1. 실험목적
2. 실험 이론
3. 실험 재료 및 방법
4. 실험 결과
5. 고찰

참고문헌

본문내용

1. 실험목적
배반포 단계인 초기 배아 발달을 시험관내에서 관찰하고 마우스 착상 전 배아를 분리하는 방법을 배운다. 또한 마우스 배아 대뇌 피질의 신경 세포를 신경 세포의 초대배양을 하기 위해 분리한다. 이후 배양을 하는 법을 배우며, ICC와 같은 면역화학염색법을 익히고 결과를 관찰한다.

2. 실험 이론
이번 실험은 동물세포인 mouse cortical neuron을 관찰하기 위해 생명과학 실험의 기본이 되는 cell culture와 immunocytochemisty를 행한다. 대뇌피질이 가지고 있는 구조적인 특징과 이 구조가 고등 포유동물에서 잘 보존되어 있다. 또한 고등 포유동물들 내에서도 영장류로 올라갈수록 더 복잡하고 정교하게 발달되어 있다. 결국 대뇌피질의 발생과정 연구는 인간의 인지, 언어, 감정과 같은 능력들이 어떻게 획득되었으며, 이의 명확한 규명이야 말로 자폐증이나 정신분열증과 같은 복잡하고 원인이 불분명한 신경계 발달 질환들을 치료하는 데 중요하다. 대뇌피질을 구성하는 신경세포들의 종류, 신경망 등에 있어서 어떤 뇌 조직보다 다양하고 복잡하기 때문에 대표적인 실험동물인 마우스의 대뇌피질을 이용해 뉴런을 직접 관찰하고 그에 관련한 이론들을 습득한다.

<중 략>

4. 실험 결과
1) Primary culture 결과
Fig. primary culture 후 관찰된 세포
옆 Fig.2 그림을 보면 확인할 수 있듯이 세포들이 떨어져 있음이 관찰 된다. 일부 세포들이 4개 이상 붙어 있는 모습을 관찰할 수 있다. 비교적 많은 세포가 있는 것을 확 인할 수 있으며 약 2~3일 후에는 Dish의 70~80% 거의 가득차 있는 형태가 관찰되고, subculture를 필요로 한다. 이 그림상 의 세포들의 모습은 pipetting을 필요로 한다. 세포들을 더 각각 떨어트려 놓는 것이 필요하다.

참고자료

· A. C. Cuello, Immunohistochemistry, Wiley
· Bullock & Petrusz, Techniques in immunocytochemisty, Academic press
· HDAC 억제제가 흰쥐 대뇌피질 신경세포의 허혈성 손상 후 신경보호와 신경 재생에 미치는 효과, Mohammad Rakibul Hasan, 학위논문, 한국교육학 술정보원
· 강호일 역, 단백질 실험 핸드북, 월드사이언스, 2007, p158~163,
· 김태전 저, 세포배양학 개론, 고려의학, 2004, p.249~252
· 김진희 역, 세포배양노트, 월드사이언스, p.50
· 인삼양영탕(人蔘養榮湯)이 Aβ를 처리한 PC12 세포와 생쥐의 손상이 뇌신경 조직에 미치는 영향, 동의신경정신과학회지, 2010년