생물화학공학이론및실험 결과 Liquid culture & Expression

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2018.11.18
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2015.06
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목차

1. Abstract

2. Experiment
1) 시약 및 장치
2) 실험 방법

3. Result & Discussion

4. Conclusion

5. Reference

본문내용

이번 실험의 목적은 액체배지 배양과 단백질 발현 조건에 대해 알아보는 것이었다. 앞선 실험에서 미리 배양된 eGFP DNA가 포함된 BL-21세포를 액체 배지에서 배양하고, 대조군으로 eGFP DNA가 미포함된 세포를 배양하였다. 세포의 배양 정도를 흡광도를 나타내는 O.D값으로 확인하여 0.6~0.8사이일 때, IPTG를 넣어주어 eGFP의 발현을 돕도록 하였고 결과를 청색의 빛에서 확인하였다.
실험 결과 액체 배지에서의 BL-21세포에 청색의 빛을 쬐었을 때, 녹색의 형광 단백질인 eGFP의 발현을 확인할 수 있었다.

시약 및 장치
- Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) : 분자생물학에서 쓰이는 시약이다. Lac operon에 의해 조절되는 protein의 발현을 위해 lactose 대신 넣어주는 물질. Lactose는 Lac Z에 의해 발현되는 β-galactosidase에 의해 분해되지만, IPTG는 분해되지 않아, Lac operon을 이용한 protein 과발현에 이용된다.

참고 자료

“생물화학공학이론및실험” 실험노트
유전자 클로닝과 DNA 분석, T.A.Brown, 월드사이언스, (2012).
[네이버 지식백과] 진탕배양기 [shaking incubator, 振盪培養器] (생명과학대사전, 초판 2008, 개정판 2014, 도서출판 여초)

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