생물화학공학이론및실험 결과 Restriction of DNA

최초 등록일
2018.11.18
최종 저작일
2015.06
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목차

1. Abstract

2. Experiment
1) 시약 및 장치
2) 실험방법

3. Result & Discussion

4. Conclusion

5. Reference

본문내용

이번 실험의 목적은 제한효소를 이용하여 DNA를 자르고, 잘려진 DNA 단편을 agrose-gel 전기영동을 통해서 크기를 분석하고, agarose-gel 전기영동 장치의 원리를 이해하고, 사용법을 숙지하는 것이었다.
DNA 제한효소를 이용하여 DNA를 절단하는 방법은 DNA의 절편 양상을 관찰하고, 또한 이러한 방법으로 만든 제한효소지도가 여러 질환의 연구에 이용된다. 이번실험에서는 앞선 2번 실험에서 PCR을 통해서 증폭한 DNA를 이용하였다. 이 DNA에서 제한효소로 원하는 부위를 절단하고 연결효소를 통하여 DNA를 연결해주는 것까지 원래 이번 실험의 본래 목적이었다. 그러나 연결효소를 통해서 DNA를 재조합하는 과정은 학부과정에서는 실험결과값을 얻기가 어려운 실험이었기에 우리 실험에서는 제한효소를 이용하여 DNA를 절단하는 과정까지만 진행 하였다.
실험에서는 선형 DNA를 NdeI와 EcoRI로 절단하였고 전기영동 결과 2개의 밴드가 나타났다, 조교님께서 대조군으로 하신 실험에서는 플라스미드 벡터를 XhoI까지 사용하여 절단 하였으므로 전기영동 결과 크게 3개의 밴드가 나타났다. 우리조의 실험결과, 다른조에 비하여 1.7kbp의 DNA 단편이 이룬 밴드가 적게 나타난 편이었고, 2.5kbp의 DNA 밴드가 나타났는데, 이는 제한효소인 EcoRI의 절단이 잘 이루어지지 않았음을 의미한다.

참고 자료

“생물화학공학이론및실험” 실험노트
실험기기 이론과 실제, 김옥진, 문운당, p113~p118, p126~p131, (2013).
진단 분자 생물학, 강희규 외 8인(공), 현문사, p150~p159, (2006).
생화학 길라잡이, 박인국, 라이프사이언스, p201~p203, (2013).
왓슨 분자생물학, Watson 외 5인(공), 바이오사이언스출판, p147~p155, 2014.
유전자 클로닝과 DNA 분석, T.A.Brown, , 월드사이언스, p50~p64, (2012).
Restriction Enzyme EcoR1, WEHImovies, https://youtu.be/aA5fyWJh5S0.
Ecoliwiki, http://ecoliwiki.net/colipedia/index.php/pET-22b(%2B)
뉴클레오타이드, 위키백과, http://ko.wikipedia.org/wiki

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