배양세균의 혼탁도 측정 실험

소개

[액체배지 접종]
[진탕배양기 사용방법]
[혼탁도 측정 실험]
[실험 결과와 고찰]

목차

없음

본문내용

배양세균 베스트를 뽑아 지난시간 배양튜브에 담아논 액체배지에 접종했다.
loop로 배양세균을 따내서 액체배지가 들어있는 배양 튜브(BD제조사)에 접종하고 배양(incubation) 했다.

접종한 배양튜브는 뚜껑이 달칵거리게 닫아서 진탕배양기에 45보다 낮은 기울기로 꽂아놓았다.
(11월 17일 하루 전에 봉사조가 진탕배양기에 꽂아 놓았다.)

액체배지 배양할 때 주의할 점
사람으로 생각해 보기. 물속은 산소가 굉장히 적다. 액체배지는 산소를 잘 공급해 주어야한다. 다시말해서 산소가 액체배지에 잘 녹아들어가게 해줘야 한다.
튜브나 플라스크에 배양할때는 250ml 플라스크를 쓴다면 액체배지는 50ml넣어주는 것이 공기가 가장 잘 공급되는 조건이다. 다시말해 5:1로 넣어주는 것이 좋다. 진탕배양기에 45보다 낮게 꽂아 주는 것도 공기가 잘 공급되는 조건이다. 배지액 속의 산소 농도를 DO라고 한다.

<진탕배양기 사용방법>
37도 180rpm에서 배양했다.
(초록스위치가 전원스위치)

배양액의 세균수는 배양시간과 세균수 그래프에서 S자 형을 그리는데 어느 순간 자라지 않는 타이밍이 존재한다.
세균수를 구하는 방법에는 4가지가 있는데 첫 번째로는 현미경을 이용하는 방법이다. 프레파라트에 100l를 떨어뜨리고 현미경으로 수를 센다. 이 방법은 미생물엔 이용하지 않고 동물세포 배양에 쓰인다. 두 번째로는 건조균체량이 있다. 이것은 원심분리를 이용하는것인데 원심분리에 의해 밑에 가라앉은 균체를 드라이 오븐에 말리는 것이다. 세 번째는 생균 수 측정이 있다. 이것은 다음 주에 실험 할 예정이다. 마지막으로는 목요일날 실험한 혼탁도(turbidity) 측정이 있다. 제일 간단하지만 가장 부정확한 이 방법은 분광광도계(spectrophotometer)을 이용해 흡광도를 측정하고 세균수를 어림잡아 생각해 보는 것이다. 분광 광도계의 원리는 광원이 빛을 발싸하면 단색화 장치를 지나 큐벳에 담긴 시료액을 통과해 광도계로 도달하는 것이다. 시료액을 통과할 때 빛이 얼마나 시료액을 통과하느냐를 보는 것이다.

참고자료

· 없음