피펫사용법 전기영동 관련 등 생물실험 report

목차

1. 올바른 Micropippette 사용법에 대해서 설명하라.
2. 전기영동실험기법에는 수평형(horizental)과 수직형(vertical)이 있다. 각각의 장·단점을 설명하라.
3. Agarose gel과 Polyacrylamid gel의 Polymerization과정을 설명하라.
4. 0.8%의 Agarose gel을 사용하여 크기는 같지만 여러 가지 다른 형태의 DNA를 분석하려고 한다. DNA가 Circular covalently closed(Supercoil)형태, Open circular형태, Linear형태로 되어있을 때 예상되는 전기영동거리를 설명하라.

본문내용

1R-1. 올바른 Micropippette 사용법에 대해서 설명하라.

마이트로파이펫(Micropippette) 사용법
A. Tip 사용법: 사용하기 전에 앞 부분에 일회용 플라스틱 팁(tip)을 부착시켜
사용한 다음 사용 후 버린다. 팁을 부착시킬 때는 돌려서 끼운다.

B. 용액의 채취 및 이동: 마이크로 파이펫의 끝부분은 1단, 2단으로 되어있어
시료를 채취할 경우에 가볍게 (1단) 누를 후 고정시킨 후 시료(용액)에 팁을
1~2 mm 정도 되게 담근 후 다시 천천히 올린다. 원하는 용기에 이동시킨 후
다시 끝 (2단) 까지 누르면 용액이 배출된다.

(1) 부피의 설정: 필요한 부피가 설정되면 피스톤이 적당한 위치로 이동하게
된다. 부피는 3개의 숫자로 표시되고 위에서 아래로 읽는다.
붉은 색 숫자는 P20에서는 0.1 ul를 의미하며 P1000에서는
0.1ml (100ul)을 나타낸다.

(2) 흡입을 위한 준비: 시료의 흡입에 앞서서 푸쉬버튼을 눌러야 한다.
피스톤이 내려가면서 설정한 액체의 부피만큼 공기를
배출한다.

(3) 시료의 흡입: 푸쉬버튼을 놓으면 팁의 내부에 부분적으로 진공이 형성된다.
대기압력은 팁안의 구멍을 통하여 원하는 부피가 흡입되도록
해준다.

(4) 시료의 분배: 푸시버튼을 다시 누른다. 피펫shaft와 팁의 압력은 증가하게
되고 압축된 공기는 액체를 팁 밖으로 밀어내게 된다.

C. 사용된 Tip의 배출: 팁배출 버튼을 누르면 배출되며 적당한 통에 버린다.

1R-2. 전기영동실험기법에는 수평형(horizental)과 수직형(vertical)이 있다. 각각의 장·단점을 설명하라.

수평형(horizental) 전기영동법은 방법이 간단하고 소요되는 시간이 짧을 뿐 아니라 밀도, 기울기, 원심분리법으로는 분리할 수 없는 DNA조각들의 혼합물을 분리. (DNA나 RNA에 주로 사용 100bp 이상 20Kb까지의 DNA를 분리하는데 사용.

참고자료

· 없음