(연세대 일반생물) transformation

소개

연세대 일반생물2 A+ 받은 레포트입니다.

목차

1. 이론
2. 실험결과
3. 결과분석
4. 토의 및 건의사항
5. 참고문헌

본문내용

Discussion
이번 실험은 대장균에 앰피실린 저항 유전자와 특정 DNA가 삽입된 plasmid를 주입하고, 앰피실린 배지에 길러, 잘 재조합된 박테리아를 선별하는 실험이었다.
이번 실험은 성공적이었지만, 콜로니가 잘 생성되지 않았다면 그 요인으로 두가지를 생각해 볼 수 있을 것이다.
첫째로, DH5a cell에 DNA를 삽입시키는 과정에서 충격을 가하는 실수를 하는 경우이다.
우리는 이 과정을 조심스럽게 진행하였는데, 이는 competent cell이 되어 약해진 cell에 충격을 주어 cell death를 유발하거나, cell membrane의 conformation에 변형을 주지 않기 위함이었다고 생각된다.
Heat shock시 튜브를 흔들지 않게 한 것도 conformation이 유동적으로 변형된 membrane에 DNA가 삽입되는데 방해되는 요인을 통제하기 위함이었다.
만약 충격이 가해졌다면, ampicillin내성 플라스미드가 삽입되지 않은 대장균 수가 많아지기 때문에 매우 적은양의 colony만 관찰되었을 것이다.

참고자료

· Cambell Biology, 9th edition, Reece,Urry,Cain, 20장 유전학, 398~400pg
· http://blog.naver.com/kangyu718?Redirect=Log&logNo=40194699798 competent cell 만드는 원리
· http://blog.naver.com/nardlove?Redirect=Log&logNo=110162747448 ampicillin, kanamycin 화학 구조 사진