Generate a Standard Curve for Maltose

목차

Ⅰ. Introduction (서론)
Ⅱ. Meterials & Method (재료 및 방법)
Ⅲ. Results & Discussion (결과 & 논의)
Ⅳ. Reference (참고문헌)

본문내용

- 분광광도계를 이용한 실험원리
그림 . 시료 중에 흡광물질이 존재할 때와 존재하지 않을 때의 시료를 통과한 빛의 강도
일반적으로 빛(백색광)이 물체에 닿으면 그 빛은 ① 물체의 표면에서 반사되는 빛 ② 물체의 표면에서 조금 내부로 들어간 후 반사되는 빛 ③ 물체에 흡수되는 빛 ④ 물체를 통과하는 빛으로 나누어지는데 물체에 의하여 흡수되는 빛의 양은 그 농도에 따라 다르다. 그러므로 이와 같은 빛의 흡수현상을 이용하면 시료용액 중의 빛을 흡수하는 화학물질의 양을 정량할 수 있다. 이와 같이 시료용액, 또는 적당한 시약을 넣어 발색시킨 용액의 흡광도법이라고 하는데 주로 자외선(ultraviolet, 180~320nm) 및 가시광선 (visible, 320~800) 영역에서 빛의 흡수를 이용한다. 그림 1에서 보는 바와 같이 빛이 시료를 통과하게 되면 시료에 의하여 빛이 흡수되기 때문에 빛의 강도는 약해진다. 시료용액을 통과한 빛의 양(transmittance, T)은 흡광물질이 존재하지 않았을 때의 빛의 강도(I0)에 대한 흡광물질이 존재할 때의 빛의 강도(I), 즉 T=I/I0로 표시되기 때문에 빛의 통과율은 항상 1보다 작으며 다음과 같이 %로 표시될 수 있다. -> %T= T×100

그림 2. Cuvette의 직경이 빛의 통과율에 미치는 영향
빛의 통과율은 시료의 농도와 특별한 상관관계를 나타내지 않지만 그 로그함수는 다음과 같이 시료의 농도와 일정한 상관관계를 나타낸다. -> - log T=K×C
여기서 C는 시료 중의 흡광물질의 농도이고 K는 상수이다. 위의 식에서 -log T를 흡광도(absorbance,A) 라고 한다면 흡광도는 시료의 농도와 특별한 상관관계를 지니게 된다. 그러므로 강도를 비교하여 얻어지는 것이다 . -> A = K×C
이러한 관계를 Beer's law라고 한다. 하지만 시료의 흡광도는 위에서 설명한 시료 중의 흡광 물질의 농도에 의해서만 결정되지 않는다. 즉 그림 2에서 보는 바와 같이 cuvette의 직경 또는 폭에 따라서 흡광도는 달라진다.

참고자료

· 광도계법-분광광도계원리. 분광광도계원리. 접속일자: 2009년 4월 5일
· http://www.nics.go.kr/R_Study/mpaqec/instrumental/photomether/spprinciple.htm