생화학실험 두번째. 전기영동

최초 등록일
2015.04.13
최종 저작일
2014.11
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건국대학교 생화학실험 A+ 자료
전기영동 과정, 결과, 고찰, 주의사항, 참고사항

목차

1. 실험일자
2. 실험제목
3. 실험목적
4. 실험원리
5. 실험재료
6. 실험과정
7. 실험결과
8. 고찰
9. Question & Answer

본문내용

전기영동이란 DNA와 같이 전하를 띤 고분자 물질을 전기장을 띤 매질(gel)에서 이동 분리시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법을 가리킨다. DNA는 디옥시뉴클레오티드를 단위체로 하여 구성된 중합체이다. 디옥시뉴클레오티드는 5탄당, 염기, 인산으로 구성되어 있다. 구성성분인 인산기로 인해 DNA분자는 수용액에서 음전하를 띠므로, 매질에 주입한 후 전장을 걸어주면 매질 내에서 양극 쪽으로 이동하게 된다. 이러한 성질을 이용하여 DNA분자를 크기에 따라 분리할 수 있다. 이동하는 입자의 속도는 전하량, 크기와 형태, 용액의 pH, 용액에 있는 다른 전해질의 농도와 이온의 세기, 매질의 종류 등 여러 가지 요인에 의하여 결정된다. 전기영동에는 분리하고자 하는 물질의 특성 및 분리 목적에 따라 수평 또는 수직 전기영동법이 있으며, 지지체(매질)의 종류에 따라 다시 거름종이, 셀룰로오스, 아가로오스 젤, 아크릴아마이드 젤 전기영동 등 다양한 방법으로 나누어진다. DNA나 RNA 또는 단백질 분자들은 모두 전하를 띠고 있어서 전기영동 방법에 의한 분리가 널리 이용되고 있다.
아가로오스 젤 전기영동은 DNA를 전기영동할 때 망상구조를 반 고형상 지지물질로 아가로오스라는 물질을 이용한다. 크기가 다른 여러 DNA분자를 아가로오스 젤 속에 넣고 전장을 걸어 주면 DNA분자는 이 아가로오스 속에서 양극(+극)으로 이동하게 된다. 이 때 DNA분자는 크기가 작을수록 빨리 움직인다. 우뭇가사리 등의 해초류에서 정제,건조한 한천은 아가로펙틴과 아가로오스가 주성분인데, 한천에서 아가로펙틴을 제거한 것이 아가로오스이며, DNA, RNA 및 플라스미 등을 분리하는 전기영동의 젤 재료로 유용하게 쓰인다.

5.실험재료 : DNA sample(첫번째 실험 때 얻은 DNA), Agarose, 전기영동 완충액 0.5X TBE(Tris-borate), microwave, Ethidium bromide(EtBr), 삼각플라스크, 메스실린더, 마이크로피펫, gel box, 전기영동장치, Dye, DNA 레더(Marker), UV light, 화학저울

참고 자료

http://4v5b6n.blog.me/50193990028
http://blog.naver.com/rhdydtjr99/220086973827
http://blog.naver.com/shinchon2002/205315707
http://blog.naver.com/bsi1223/90098618701
http://blog.naver.com/bjgim21/130180393283

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