유산균으로부터 생균수와 흡광도 측정 및 DNA추출 및 정제

소개

분리세균의분자생물학적동정
DNA추출및정제
PCR을이용한16S-rDNA복제

목차

1. 실험제목
2. 서론
3. 실험방법
4. 결과
5. 고찰
6. 참고문헌

본문내용

1. 실험제목
- 유산균으로부터 생균수와 흡광도 측정 및 DNA추출 및 정제

2. 서론
- 미생물은 크게 세균과 효모, 단세포 조류로 나눌 수 있으며, 그 중에 효모는 주조나 제빵, 연료용 알콜과 폐기물 처리 등 우리 주변에서 가장 많이 사용되고 있는 미생물이다. 하지만 아직 생장조건 및 대사산물 등 특성이 밝혀지지 않은 야생효모도 많다.
Zymomonas는 미생물 중 특이적으로 알콜 발효를 잘하는 것으로 알려져 있으며, 주조에 사용되는 많은 미생물들은 알콜 발효를 통해 생장이 일어난다. 또한 미생물은 보통 glucose와 아미노산 집합체인 yeast extract를 공급받으면 생장이 일어나지만, 특이적으로 glucose만을 공급해도 아미노산을 만들어 생장에 사용하거나, N 소스인 NH4Cl을 공급받으면 스스로 아미노산을 만들어 생장에 사용하는 미생물도 있다.
미생물을 고체 배지에 접종하는 방법은 streaking과 spreading이 있는데, streaking을 통해 배지 내에서의 희석으로 단일 colony를 좀 더 쉽게 얻을 수 있다. 미생물의 생장량 측정에는 생균법과 탁도 측정법이 있다. 탁도 측정법은 접종전과 배양 이후의 배지의 탁도를 비교 측정하여 미생물의 생장 정도를 간접적으로 측정하는 방법이다.

<중 략>

첫 실험에서 전체적으로 잘 자란 김치유산균을 배양한 배지를 사용하여 측정했으며 Glucose와 Sucrose에서 배양한 균주는 sucrose에서 가장 밀도가 높았다 Fructose와 Lactose, Starch 배지에서 교차접종한 배지는 전체적으로 밀도가 낮았다.

3] PCR
직접 배양한 세균을 샘플로 사용하여 PCR을 했으나 결과가 나오지 않았으며 2차실험에 미리 준비된 DNA를 사용하여 재실험을 했지만 전기영동 후 확인되지 않았다.

4] HPLC
크로마토그래피 분석장비를 이용한 각 샘플들을 column에 주입 후 그림으로 나타나는 샘플의 성분을 분석중 모니터로 표시되는 피크를 통해 확인했다. [사진첨부]

참고자료

· 미생물과 효소의 이용 (순천대학교) - 김정호