Exp 1. Making of Competent Cell

소개

본 과제는 대구대학교 생명과학과
2011년 2학기 분자생물학실험에서 Competent Cell 제작 실험으로,
관련 전문서적, 전공서적 및 다른 선배의 동일 실험 보고서를 참고 하여, 작성 되었습니다.
또한 실험에 충실히 참여하여 사진 자료도 첨부를 하였습니다.
평가 또한 최상으로 받았으며, 차후 실습 후 참고 하시어 보고서를 작성 하시는데 무리가 없으리라 사료 됩니다
* 과제 작성 완료후 참고문헌 작성시 아래의 문장을 같이 넣어 주시면 대단히 감사하겠습니다.

Jin Gwon Yu, 2011. Experiment of Mlecular biology Report[Making of Competent Cell]. Daegu university, College of natural sciences Department of LifeScience, pp. 1-9.

목차

Ⅰ.서론
1. 실험목적
2. Additional explanations

Ⅱ.본론
1.실험과정

Ⅲ.결론
1. 고찰

-참고문헌

본문내용

1. 실험목적 : Transformation에 필수적인 Competent Cell을 만드는 방법과 제작 과정 중 어떤 주의할 점이 있는가를 실험실습을 통해 익혀보고, -70℃에 보관해서, 다음 실험에 활용 하는데 있다.

2. 실험재료 및 도구: Ampicilin[항생제], LB, Agar
E. coli 단일 Colony, LB배지, Cacl₂용액(4℃ 보관)

1L Bottle * 4, 유산지, 시약스푼, 전자저울, 메스실린더, 페트리디시, Auto clave, 방열장갑, Micro pipet,
100㎕ tip, 원심분리기, 50㎖ 원심분리기용 튜브, E-튜브, 항온수조, 양팔저울, Ice, 호일, 플라스크, 핀셋, 이쑤시개, 클린벤치

<중 략>

첫째, 실험 목적에 따른 배지 제작에 있어 착오가 없어야 한다. 이유는 위와 두 Table과 같은 조성의 차이가 있어서이다. 같은 LB배지이지만, 조성이 다르다. Table 1.은 미생물학 실험에서 쓰이는 Lactose broth 배지이고, Table 2.는 차후에 있을 대장균 형질전환 실험을 위한 영양배지이다.
마지막으로 둘째, Ampicilin을 넣을 때 병이 적당히 식은 뒤에 넣어야 한다는 것.
항생제의 구성에 있어 최소단위가 무엇인가? 그것은 단백질이다. 단백질은 고온에서 변성을 일으키게 된다. 그러므로 병이 적당히 식지 않은 상태에서 Ampicilin을 피펫으로 넣게 된다면, 단백질로 구성된 Ampicilin은 변성을 일으켜, 차후 있을 형질전환 실험 진행에 있어 결과를 도출 하지 못 하게 될 것이므로 필히 주의 할 필요가 있다.
또 실험과정 11번에서 적당히 식은 온도라는 것은 실험에 있어 다음 사람이 보고서를 보고 실험을 진행함에 있어 매우 정확하지 못한 표현이다. 대략적으로 ≒45℃~55℃ 범위까지 내려와야만 Ampicilin이 변성되지 않을 것으로 사료된다.

참고자료

· Dong yun Lee, 2010. Experiment of Mlecular biology Report[Making of Competent Cell]. Kyungpook National University, pp. 1-3.
· Jin Gwon Yu, 2010. Experiment of Microbiology Report[Making of Culture medium]. Daegu university, College of natural sciences Department of LifeScience, pp. 1-5.
· O Gwang Gwon. 2010. Experiment of Molecular biology Report[Making of Competent Cell]. Kyungpook National University, pp. 1-4.
· 남상욱, 권혁빈, 최선심, 2011. 유전공학의 이해. 라이프사이언스, pp. 89-91.
· Luria-Bertani Broth
· http://soo8lo.blog.me/126247643
· http://blog.naver.com/lkh0426?Redirect=Log&logNo=100048722855