그람염색법과 원형질분리관찰

소개

동물생리학 및 실험 보고서입니다.

목차

1. Title
2. Date
3. Name/ 조이름
4. Purpose
5. Materials
6. Methods
7. Results
8. Discussion
9. Reference

본문내용

6. Methods:
<박테리아 시료의 도말>
① 슬라이드글라스를 깨끗이 닦고 도말할 부위를 확인한다.
② 백금이를 멸균하고 준비된 박테리아 순수 배양액에 담가 시료를 취한다.
③ 백금이에 묻은 시료를 슬라이드글라스 위에 묻힌 후 백금이를 사용하여 슬라이드글라스 상에서 얇게 펼쳐준다.
④ 시료가 도말된 슬라이드글라스의 양쪽 끝을 잡고 알코올램프 불꽃 위로 서너차례 빠르게 통과시켜 도말된 시료가 슬라이드글라스에 완전히 말라붙도록 한다. 이렇게 건조된 도말 시료는 염색법을 통해 관찰하게 된다.
<그람 염색>
① 건조된 도말 시료를 크리스탈 바이올렛 염색시약으로 1분간 염색한 후 세척병의 물로 약 2초간 염색시약을 씻어낸다.
② 그람 요오드 용액으로 1분 동안 처리한 후 2초간 물로 씻어낸다.
③ 95% 에탄올로 10-20초 동안 탈색시킨 후 2초간 물로 씻어낸다.
④ 사프라닌 용액으로 45초 동안 대조 염색 후 2초간 물로 씻어낸다.
⑤ 염색된 도말 시료 슬라이드를 공기 건조시키거나, 흡수종이 또는 티슈를 사용하여 부드럽게 물기를 흡수시켜 건조시킨다.
⑥ 광학 현미경으로 낮은 배율로 부터 시작하여 관찰한다.
<원형질분리>
① 각 100ml 비이커에 다양한 농도의 설탕 용액을 준비한다. (0M, 0.1M, 0.2M, 0.25M, 0.30M, 0.40M, 0.45M, 0.5M, 0.6M)
② 양파의 표피세포를 벗겨 조각 (직경 약 1mm 정도)을 각 용액에 30분 이상 담가둔다.
③ 현미경에서 각 용액 당 30개 이상의 세포를 관찰하여 그 중 원형질 분리가 일어난 세포를 센다.

참고자료

· 미생물학/ 아카데미서적/ 04.08.20/ 최호형 저/ p. 22
· 최신 생명과학/ 동국대학교출판부/ 03.03.05/ 김주필 저/ p.80~81