cell culture myoblast-myotube 결과.

목차

1. 결과
2. 토의

본문내용

사진 1에서 Hematoxylin으로 stain된 Myoblasts를 관찰할 수 있다(48h). 모양이 조금 길게 생겼지만 각 세포당 하나의 핵을 가지고있다. 사진 2에서도 마찬가지로 stain된 Myotubes를 관찰할 수 있었다(72h). 사진1에 비해서 밀도가 낮고 세포의 모양이 관 형태로 많은 부분 바뀌어있다. 시간이 흐름에 따라 각각의 Myoblasts가 서로 fusion되어3개 이상의 핵을 가지는 Myotubes로 분화함을 확인할 수 있었다. 원래 topic대로라면 위의 두 사진으로 Fusion index를 산출해야 하지만 이번 실험에는 주어진 자료사진을 이용해 산출하는 것으로 대신한다.

사진 3은 Rhdamin-Palloidin으로 Immunostaining된 세포질 사진과 Hoechst33258로 Immunostaining된 핵의 사진을 겹친 모습이다. 각 세포당 하나의 핵이 들어있는 것이 뚜렷하게 보인다. 반면에 사진 4에서는 일렬로 배열되어있고 아직 tube로 분화되지 못한 Myoblast들과 하나의 tube형 세포에 여러 개의 핵이 들어있는 모습을 관찰할 수 있다.

토의
세포에는 여러종류가 있다. 종류에 따라 몇몇 특이한 분화를 하는 종류가 있는데, 근육을 형성하게 되는 근원세포(Myoblast)의 경우 분화 과정에 세포들끼리의 융합이 일어난다. 초기에 근원세포는 빠른 속도로 증식하다가 주변에 존재하던 성장인자들이 사라지게 되면 서로 접촉하면서 정렬하기 시작한다. 이 단계에서 세포 증식이 중단되고 DNA합성이 정지된다. 이어서 세포막이 융합되는 현상이 일어나는데, 그 결과 하나의 세포에 여러 개의 핵이 들어있는 관모양 다핵세포가 만들어진다. 그것이 근관세포(Myotube)이다. 위의 실험을 통하여 이미 밝혀진 근육발생의 초기단계, 근원에서 근관이 형성되는 과정을 확인할 수 있었다. 이번 실험은 간단하지만 근육 형성에 관계된 실험에는 가장 기본이 되는 실험으로, 좀더 심화하여 각 단계에서 작용하는 요인을 밝힐 수도 있을 것이다. 세번째 단계에서 세포가 융합될 때 어떤 효소나 인자가 관여하는지 혹은 이 실험의 시간적 연장선상으로 초기근관이 성숙한 근관으로 형성되는 과정을 탐구하는 것도 좋겠다.

참고자료

· 길버트 발생생물학, 2007, Scott F. Gilbert, 강해묵 역, 라이프사이언스
· 발생생물학의 이해, 2002, 정해문 외 공저, 교학연구사
· 생명과학대사전, 2008, 강영희, 아카데미서적 (NAVER지식사전)