PCR (polymerase chin reaction)

소개

PCR

목차

없음

본문내용

Abstract
PCR 방법의 원리는 DNA 주형의 denaturation, primer annealing, polymerase에 의한 DNA 합성의 세 단계를 여러 번 반복함으로써 미량의 DNA 주형으로부터 원하는 DNA 부위를 대량으로 얻는 방법이다.
Introduction
PCR(Polymerase chain reaction)
PCR은 DNA의 원하는 부분을 증폭하는 방법으로, DNA molecule의 어느 부분이든지 그 border sequence만 알면 이 방법을 통해서 증폭할 수 있다.
PCR 반응 조건
-효소
효소 적정 농도는 100 μl 반응액에 1-5 units 사이이며 일반적으로 2.5 units 정도를 사용하면 만족스러운 결과를 얻을 수 있다. PCR 산물의 길이에 따른 반응시간은 nTaq DNA polymerase는 1 kb당 1분, nPfu DNA polymerase는 2분이 적당하다.
-Mg
Mg의 적정 농도는 1.5-5 mM 사이이며, 일반적으로 각각 0.2 mM의 dNTP를 사용할 경우 1.5 mM의 Mg 농도에서 좋은 결과를 얻을 수 있다.
-dNTP
dNTP 적정 농도는 50-500 μM 이며, 200 μM dNTP 농도가 가장 일반적으로 사용된다.

참고자료

· 유전공학의 이해 - 남상욱, 권혁빈, 최선심