PCR의정의와 응용분야

소개

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목차

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I. 서론 / 1
II. 본론 / 2
1. PCR(Polymerase chain reaction) / 2
2. component of PCR / 2
(1) Primer set / 2
(2) dNTP / 2
(3) Taq polymerase / 3
(4) Mg2+ / 3
(5) Salt (KCl) concentration / 3
(6) Reaction additives / 4
(7) Reaction overlay / 4
3. PCR의 특이성 / 4
4. PCR 과정 / 5
(1) denaturation / 5
(2) annealing / 5
(3) extention / 6
(4) PCR cycle / 6
5. PCR시 고려사항 / 7
(1) Pipetting & DNA template / 7
(2) Setting up the Laboratory / 7
(3) PCR cycling program / 7
(4) Equipment (Thermocyclers & PCR tubes) / 8
6. 다양한 PCR 기술 / 8
(1) PCR-direct sequencing / 8
(2) RT-PCR(RNA 특정 부위 증폭) / 9
(3) DDRT-PCR (differential display reverse transcription-PCR) / 9
(4) QC-PCR(RNA 정량) / 10
(5) Inverse PCR / 11
(6) PCR-SSCP (single strand conformation polymorphism) / 11
(7) IS-PCR (in situ PCR) / 12
(8) RACE (rapid amplification of cDNA ends) / 12
(9) Site-directed mutagenesis / 13
7. PCR의 응용분야 / 13
(1) 작물 개량에 있어서 PCR기법의 응용 / 14
1) PCR에 기인한 RAPD marker를 이용한 종간 및 종래의 유전적 근원관계 분석 / 14
2) 주요 형질의 DNA marker 구축과 재조합율을 예측할 수 있는 염색체 지도 작성 / 16
3) 아미노산 서열에서 얻은 정보를 이용한 특정 유전자의 분리 / 23
4) 외부 환경 조건에 대한 반응 기작에 관여하는 novel gene의 동정 / 24
(2) PCR을 이용한 유전자 복제 / 25
(3) PCR를 이용한 돌연변이 탐지 / 25
1) PCR을 이용한 암의 진단 / 26
2) 혈우병의 진단 / 26
3) 점돌연변이를 탐지하는 방법 / 26
4) 바이러스감염의 초기식별에 사용 / 26
(4) PCR의 법의학 응용 / 26
(5) PCR을 이용한 성 감별 / 28
(6) 사람 유전자의 mapping / 28
(7) 식품 및 환경속의 미생물 검출을 위한 PCR의 응용 / 28
(8) GMO 확인 / 29
(9) Evolutionary biology(진화의 생물학) / 29
III. 결론 / 30
IV. 참고문헌 / 31

본문내용

Polymerase chain reaction(PCR) technique은 1980년대 중반 K. Mullis에 의해서 고안된 기술이다. 이 PCR techinique은 유전자를 연구, 분석하는 분자유전학에 혁신을 일으켰다. PCR(Polymerase Chain Reaction)법은 DNA 가닥의 열변성(denaturation step), primer와의 annealing(annealing step), polymerase에 의한 DNA 합성 신장 반응(Extension step)를 반복하여 실시함으로써 in vitro에서 DNA를 증폭하는 방법이다. 이 방법을 사용하면 DNA를 수 시간 내에 적어도 105배로 증폭할 수 있다. TaKaRa Taq(TaKaRa Code No. R001)는 Thermus aquaticus YT-1주로부터 DNA polymerase 유전자를 클로닝하여 그 유전자를 도입한 재조합체 대장균을 이용하여 대량 발현하고, 고도로 정제한 94 kDa의 내열성 DNA polymerase로 천연의 Taq DNA polymerase와 같은 기능을 갖고 있다. PCR의 원리는 DNA의 양쪽 가닥을 주형으로 하여 원하는 DNA를 증폭시키는 방법으로 전체 DNA로부터 원하는 DNA 특정 부분을 선택적으로 증폭시킨다.

참고자료

· 유전공학 1 정동효 지음 / 선진문화사 펴냄 / 1996년 1월
· http://yckim.chungbuk.ac.kr/biochem/2001/20303.html
· http://inhavision.inha.ac.kr/~leecg/bbs/biology/biology13.htm
· http://sh76.hihome.com/ImportedFiles/biology-pcrU.htm
· http://myhome.netsgo.com/kksiyi/NetsgoWizard/page20.htm