Gram staining 염색법 실험.hwp

소개

Gram staining 염색법 실험

목차

실험목적
시약 및 기구
실험원리 및 방법
실험결과
실험고찰
※보충설명
<염색법>
염색볍의 목적
염료의 종류
참고문헌

본문내용

실험목적
1884년 덴마크의 의사 H.C.J.그람(1853∼1938)이 고안한 특수 염색법으로, 표본을 아닐린수(水)·겐티아나액(液)으로 물들여서 요오드·요오드화 칼륨액으로 처리한 후, 순(純)에탄올로 씻으면, 조직은 탈색되지만 균은 탈색되지 않고 자주색으로 보인다. 그러나 그 후 여러 가지 균종이 발견되자 그 속에는 조직과 마찬가지로 에탄올 세정에 의하여 탈색되는 균도 있다는 것이 밝혀졌다. 이때 탈색되는 균을 그람음성균, 탈색되지 않는 균을 그람양성균이라 부르기로 하면서 이 염색법은 당초의 목표와는 달리 세균의 분류에 이용되기도 하였다. 그 후 양성·음성균은 화학 요법제에 대한 감수성뿐만 아니라, 균의 증식에 필요한 영양소의 종류, 물리·화학적 자극에 대한 반응, 생산하는 독소, 병변 등 각 방면에서 차이가 있다는 것을 알게 되면서 그람염색법의 의의는 증대하였다. 가장 쉬운 균 변별법으로 많은 실험에 이용되고 있다.

시약 및 기구
①그람양성균-30SC , 그람음성균-OP50(E. coli)
②Cover glass slide
③염색 시액
-Crystal violet : 다음의 용액 A와 B를 혼합하여 제조한다.
-용액 A : crystal violet 13.87g을 ethanol이 200ml에 첨가.
-용액 B : Ammonium oxalate 8g을 증류수 800ml에 첨가.
-Lugol`s 용액 : Potassium iodide 2g과 iodide 1g을 증류수 5ml에 녹이고 증류수를 가하 여 300ml을 제조.
-Decolorizer(탈색제) : Ethanol, Methanol 또는 Acetone과 alcohol을 동량 혼합해 제조.
④Counter stain 용액 : Safranine 3.41g과 ethanol이 100ml을 증류수 900ml에 혼합.

실험원리 및 방법
염색된 색깔로 그람 양성균과 음성균을 구분한다.

참고자료

· 식품미생물학실험서 : 안병용, 김동한, 김인규 : 석학당 : 2002
· (최신)미생물학 실험서 : 미생물 및 면역학 분과회 : 신일상사 : 2001