pH measurement and buffers (pH의 측정과 버퍼용액)

소개

본 레포트는 생화학실험에 사용되는 기기들의 기본적인 조작과 그 원리를 위한 기기분석 및 실험이라는 과목의 일부분으로, pH meter에 대한 보정을 통해 원하는 pH의 Tris buffer 를 만들어보고 산과 염기를 첨가하였을 때의 pH의 변화과정을 확인하며 Henderson-Hasselbalch equation을 이용해 pH변화의 이론값과 실제값을 측정함으로써 pH meter의 정확성에 대해 확인하는 실험보고서이다.

목차

Introduction
Material
Protocol
Result
Discussion

Reference

본문내용

Introduction
생체 내의 대부분의 반응은 수용액 상태로 존재하는 Biological Buffer를 매개로 이루어지게 되는데 이는 Buffer를 이루고 있는 ion들이 일정한 pH 값을 유지시키기 때문에 안정적인 physiological reaction이 가능하기 때문이다.[1] 따라서 연구하고자하는 Biochemical process에 최적화 된 pH를 적용하기 위해 적절한 buffer의 선택은 실험에 있어 매우 중요하다고 볼 수 있다.
이번 실험에서는 실질적으로 사용되는 Buffer solution을 제작하고 pH meter를 이용하여 Acid(HCl) 와Base(NaOH)를 buffer에 첨가하였을 때의 pH를 측정하고 Henderson-Hasselbalch equation을 이용하여 측정pH값과 이론상의 값을 비교해봄으로써 pH meter기의 정확도(Accuracy)를 확인해본다.

Material
Apparatus: pH meter, Measuring cylinder, Pipet, Beaker, Sample spoon, Magnetic bar
Reagent : Tris flake, distilled water, 1M HCl, 1M NaOH

Protocol
Ⅰ. pH meter Calibration
1.Standard soultion (pH7)을 이용하여 pH meter기를 보정한다.

Ⅱ. Buffer solution preparation
1.Tris의 formular weight를 확인하고 10mM이 될 수 있도록 tris flake의 질량을 계산한다. (실제 실험에서 6조가 사용할 양까지 만들었기 때문에 양을 두배로 하였다.)
Total volume: 400ml
Tris molecular weight: 121.14Da
Tris` mass (to make 10mM of Tris buffer): 0.484g
(10mM의 tris buffer를 만들기 위해서 필요한 tris의 질량은 다음과 같다 최종 농도가 10mM 즉 0.01M이 되기

참고자료

· 1. Rodney Boyer, MODERN EXPERIMENTAL BIOCHEMISTRY THIRD EDITION, (2000) 「Biochemical buffers」P.32