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실리콘 기판을 사용한 바이오센서와 회전 타원분광계를 이용한 펩타이드-항체 접합의 동특성 측정과 분석 (Measurement and Analysis of the Dynamics of Peptide-Antibody Interactions Using an Ellipsometric Biosensor Based on a Silicon Substrate)

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최초등록일 2025.07.16 최종저작일 2017.02
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실리콘 기판을 사용한 바이오센서와 회전 타원분광계를 이용한 펩타이드-항체 접합의 동특성 측정과 분석
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    • 🔬 극도로 낮은 농도의 펩타이드-항체 접합 동특성을 정밀하게 측정하는 혁신적인 방법론 제시
    • 🧬 실리콘 기판과 덱스트란 SAM을 활용한 바이오센서 제작 기술 소개
    • 📊 정확한 접합 동특성 분석을 통한 해리상수(KD) 측정 방법론 제공

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    서지정보

    · 발행기관 : 한국광학회
    · 수록지 정보 : 한국광학회지 / 28권 / 1호 / 9 ~ 15페이지
    · 저자명 : 이근재, 조현모, 조재흥

    초록

    실리콘 기판으로 만든 바이오센서에서 펩타이드-항체의 접합 동특성을 회전 타원분광계로 정밀하게 측정하고 분석하였다. 극도로 낮은 몰농도의 펩타이드를 측정할 때, 시료가 놓이는 바이오센서의 표면의 불완전한 편평도와 완충용액 굴절률 변화로 인한측정오차를 줄이기 위하여 금속박막의 유리 프리즘 대신에 실리콘 기판 위에 덱스트란 SAM을 직접 적층하여 바이오센서를 만들었다. 100 μl/min의 완충용액 주입속도에서 바이오센서에 올려진 항체 및 펩타이드의 접합특성을 각각 측정하였다. 리터당 5 ng의 낮은 항체농도에서도 항체-덱스트란 SAM 사이의 동특성을 쉽게 측정할 수 있었다. 또한 100 nM까지의 펩타이드에 대한미세한 흡착 및 해리 특성을 정밀하게 측정할 수 있었으며, 접합 동특성 식에 이 실험결과를 피팅하여 흡착계수와 해리계수를구할 수 있었다. 이 결과로부터 펩타이드의 평형상태의 해리상수인 KD는 97 nM이었고, 이 수치는 Class I에 속함을 알 수 있었다.

    영어초록

    We precisely measured and analyzed the dynamics of peptide-antibody interactions, using an ellipsometric biosensor based ona silicon substrate. To reduce the signal error due to the imperfect flatness of the substrate for extremely low concentrations ofpeptide, we fabricated the biosensor with a silicon substrate coated with Dextran SAM, instead of a glass prism coated with athin metallic thin film. At an injection speed of 100 μl/min of buffer liquid, we detected the dynamics of antibody-Dextran SAMor peptide-antibody fixed on biosensor, respectively. We detected the dynamics of antibody-Dextran SAM interactions down toa low concentration of 5 ng per liter, and we precisely measured the dynamics of association and dissociation of peptide andantibody down to 100 nM of peptide. We obtained the rate constants for association and dissociation from fitting the data byusing deduced dynamical equation. As a result, we obtained an equilibrium constant for dissociation of 97 nM of peptide-antibodycomplex, which belongs to Class I.

    참고자료

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