제대정맥내피세포와의 공조배양을 통한 제대혈조혈전구세포의 증폭

서지정보

· 발행기관 : 대한혈액학회
· 수록지 정보 : Blood Research / 39권 / 3호 / 149 ~ 157페이지
· 저자명 : 황진희, 김성우, 천재민, 박남숙, 박수진, 박상은, 윤환중, 조덕연, 김상용

초록

배 경:조혈성장인자, stromal cell-derived factor-1 (SDF-1) 및 제대정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cells) 등 3자가 공존하는 제대혈세포 증폭시스템의 타당성을 검토하고자 하였다.
방 법:CD34양성세포를 대상으로 무혈청배지를 사용한 단순 액상배양 및 제대정맥내피세포와 공조배양(이하 공조배양)을 시행하면서 thrombopoietin, flk-2 ligand 및 kit-ligand (각각 50ng/mL) 등 3가지 조혈성장인자를 병용하거나 (TFK), 이에 SDF-1 (100ng/mL)을 추가로 첨가하였다. 배양 후 유핵세포, CD34양성세포 및 집락형성세포의 증폭 정도를 분석하였으며, 증폭된 세포의 apoptosis를 annexin V를 이용한 유세포분석으로 측정하였다.
결 과:7일 동안의 액상배양에서 TFK의 3자 병용으로 유핵세포는 43.4±3.8배, CD34양성세포는 19.0±3.2배, 집락형성세포는 13.8±2.1배 각각 증폭되었다. TFK에 SDF-1을 첨가함으로써 경미하게 CD34양성세포 및 집락형성세포의 증폭이 향상되었다. 배지의 교환 없이 7일보다는 10일 배양에서 CD34양성세포 및 집락형성세포 증폭 모두 현저히 증가하였으나, 배양기간을 14일 또는 그 이상으로 했을 때에는 오히려 감소하였다. 공조배양으로 CD34양성세포 및 집락형성세포의 증폭은 액상배양에 비해 유의하게 증가하였으며, TFK에 SDF-1을 병용한 경우에는 증폭이 더 향상되었다. Null-adenoviral vector를 transfection시킨 제대정맥내피세포와의 공조배양에서는 대조군 공조배양에 비해 CD34양성세포 및 집락형성세포 모두 유의하게 증폭이 향상되었다. 공조배양에 SDF-1을 단독 첨가했을 때 첨가하지 않은 경우에 비해 부유층에 annexin V 음성 세포가 현저히 많았고, TFK의 3자 병용 시에도 SDF-1의 추가로 annexin V 음성세포가 소폭 증가하였다. 부착세포의 경우도 SDF-1 단독 처리군에서 첨가하지 않은 경우에 비해 annexin V 음성 세포가 많았다. 그러나 TFK의 3자 병용 시에는 SDF-1의 추가로 유의한 변화가 없었다.
결 론:조혈성장인자, SDF-1 및 제대정맥내피세포의 3자가 공존하는 증폭시스템이 보다 효율적인 조혈전구세포의 증폭을 위한 새로운 모델이 될 수 있을 것으로 사료된다. 이 시스템에서 전구세포 뿐 아니라 조혈모세포 수준에서도 증폭이 유도되는지 확인되어야 하겠다.

참고자료

· 없음