Parthenolide와 5-fluorouracil 병용처리에 의한 SW480 대장암 세포의 사멸증진 효과에관한 연구 (Synergistic Effect of Parthenolide in Combination with 5-Fluorouracil in SW480 Cells)

서지정보

· 발행기관 : 대한장연구학회
· 수록지 정보 : Intestinal research / 10권 / 4호 / 357 ~ 364페이지
· 저자명 : 김세림, 전병준, 김성훈, 김인희, 이승옥, 이수택, 김상욱, Thu Trang Thi Kieu

초록

목적: 5-Fluorouracil (5-FU)는 대장암 및 여러 종류의 암치료에 널리 쓰이고 있으나 그 부작용 또한 크다고 알려져 있다. 최근 parthenolide (PT) 와의 병용 투여에 따른 복합 항암요법의 효능이 여러 연구자들에 의해 증명되었다. 이번 연구에서는 대장암 세포에 5-FU와 PT의 병용투여로 인한 암세포의 사멸 효능 여부 및 그 작용기전에 대하여 연구하고자 하였다.
방법: 사람 대장암 세포로는 SW480 세포주를 사용하였다. 5-FU 단독 처리 및 병용 처리에 따른 대장암 세포의 생존율을 확인하기 위하여MTT assay를 시행하였다. 또한 병용 처리와 단독 처리에 따른 세포의 형태 관찰, 핵 내의 DNA 응집 정도 관찰, 그리고 annexin-V FITC를이용한 fluorescence-activated cell sorter (FACS) 분석을 통하여 세포사멸을 확인하였다. 마지막으로 세포 사멸에 따른 caspase의 활성화 정도를 확인하기 위하여 western blotting을 시행하였다.
결과: SW480 세포에 50 μM의 5-FU를 단독 처리하였을 경우 생존율은 77.24±5.02%였으나 10 μM의 PT와 병용 투여했을 경우(5-FU 동일 농도) SW480 세포의 생존율은 33.87±9.02%으로 단독처리 시보다 약 43% 가량 감소되었다. 약물병용 처리에 따른 세포의 morphology를확인한 결과 병용 처리 후 세포가 응축되고 크기가 줄어든 것을 확인하였으며 Hoechst 33258 staining 후 DNA의 분절 및 응축이 관찰되었다. 또한 annxin-V를 이용한 FACS 분석 결과 병용 투여 후 세포사멸이 증가되었다. Western blotting을 시행한 결과 caspase 3와 8의 활성화 정도가 미처리 및 단독처리 후 큰 차이를 보이지 않았으나 병용 처리 후 발현이 증가됨을 확인하였다.
결론: 이번 연구를 통하여 저용량의 5-FU와 PT의 병용으로 효율적인 암세포 사멸 효과를 발휘하는 효과적인 항암 병용요법의 가능성을 확인하였다.

영어초록

Background/Aims: Parthenolide (PT) is responsible for the bioactivities of Feverfew. Besides its potent anti-inflammatory effect, this compound has recently been reported to induce apoptosis in cancer cells. Unfortunately, many of the therapies that use 5-fluorouracil (5-FU) alone or in combination with other agents are likely to become ineffective due to drug resistance. In the present study, we investigate the antitumor effect of PT combined with 5-FU on colorectal cancer cells. Methods: SW480 cell was employed as a representative of human colorectal carcinoma (CRC) cells. We performed MTT, annexin-V assay, and Hoechst 33258 staining to measure the synergistic effect. Western blotting was used to demonstrate apoptotic pathway. Results: Our result demonstrated that PT inhibited the viability of colorectal cancer cells and had synergistic anti-proliferation in combination with 5-FU. After combined treatment of 5-FU and PT, enhanced apoptotic cell death is observed using annexin-V FITC assay and it was revealed by the condensed chromatin and fragmented DNA. Compared with 5-FU or PT alone, the apoptosis of colorectal cancer cells treated with PT and 5-FU enhanced the activation of caspase-8, caspase-3. Conclusions: Combined treatment with PT may offer an efficacious strategy to overcome 5-FU resistance in certain CRC cells.

참고자료

· 없음