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서울대학교 물리분석실험 형광정량분석 결과 보고서

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최초등록일 2025.07.18 최종저작일 2024.05
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서울대학교 물리분석실험 형광정량분석 결과 보고서
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    목차

    1. Abstract
    2. Introduction
    3. Data & Results
    4. Conclusions
    5. Discussion
    6. Homework
    7. References

    본문내용

    Abstract
    Fluorescene spectroscopy에서는 형광에 의해 물질에서 방출되는 빛을 분석해 물질의 정성적, 정량적 분석을 진행한다. 미지 시료의 정량적 분석에는 농도를 아는 표준 용액을 통해 calibration curve를 그리고 미지 시료의 신호를 대입하는 external standard 방법과, 일정량의 미지시료에 다른 양의 표준 용액을 더해 신호 변화를 확인하는 표준물 첨가법이 있다. 또한 Stern-Volmer equation을 통해 형광 소광 효과를 나타낼 수 있다.[1] 본 실험에서는 형광 분석과 external standard, 표준물 첨가법을 활용해 미지 시료의 퀴닌 농도를 구하고, 퀴닌에 대한 염화 이온의 형광 소광을 Stern-Volmer plot으로 확인하고자 했다. 이를 위해 퀴닌 표준 용액을 이용해 calibration curve를 그리고, 미지 용액에 여러 농도의 표준 용액을 더해 두가지 방법으로 미지 시료의 퀴닌 농도를 구했다. 또한, 퀴닌 용액에 NaCl을 다른 농도로 더해 Stern-Volmer plot을 그렸다. External standard를 사용한 방법에서는 미지 시료 1, 2의 농도가 각각 0.496ppm, 1.983ppm임을 확인했고, 표준물 첨가법을 통해서는 두 용액의 농도가 각각 1.458ppm, 0.335ppm임을 얻었다. 또한 Stern-Volmer equaiton을 통해 퀴닌에 대한 Cl¬-의 Ksv가 0.0023ppm-1임을 구했다.

    Introduction
    형광(Fluorescence)은 특정 화합물이 에너지를 흡수한 후 그 에너지를 빛의 형태로 방출하는 현상이다.

    참고자료

    · Ashutosh Sharma; Stephen G. Schulman Introduction to Fluorescence Spectroscopy; New York: Wiley, 1999
    · Gauglitz, G.; Vo-Dinh, T. Handbook of spectroscopy, Wiley-VCH, 2003
    · Yoshihiro Yamaguchi; Yoshio Matsubara; Takanori Ochi; Tateaki Wakamiya; Zen-ichi Yoshida. How the π Conjugation Length Affects the Fluorescence Emission Efficiency. J. Am. Chem. Soc. 2008, 130 (42), 13867-13869.
    · Z. Varkonyi; K. Kabok. Effect of temperature on light-absorption and fluorescence of the peroxidase. Acta. Biochim. Biophys. Acad. Sci. Hung. 1975, 10 (1-2), 129-137.
    · Lakowicz, J. R. Principles of Fluorescence Spectroscopy, Boston: Springer, 2006
    · Albani, J. R. Structure and Dynamics of Macromolecules: Absorption and Fluorescnece Studies, Elsevier, 2011
  • AI와 토픽 톺아보기

    • 1. 형광분광법(Fluorescence Spectroscopy)
      형광분광법은 분석화학에서 매우 강력하고 민감한 분석 기법입니다. 이 방법은 형광 물질이 빛을 흡수한 후 방출하는 형광을 측정하여 물질의 농도와 특성을 파악합니다. 특히 높은 선택성과 감도를 제공하여 극미량의 물질도 검출할 수 있다는 점이 장점입니다. 생화학, 환경분석, 의약품 분석 등 다양한 분야에서 활용되고 있습니다. 다만 형광 물질이 제한적이고 배경 형광(autofluorescence)의 간섭이 발생할 수 있다는 단점이 있습니다. 현대 분석화학에서 필수적인 기법이며, 지속적인 기술 발전으로 더욱 정확하고 신뢰할 수 있는 분석이 가능해지고 있습니다.
    • 2. Calibration Curve와 External Standard 방법
      Calibration Curve와 External Standard 방법은 정량분석의 기본이 되는 표준적인 기법입니다. 알려진 농도의 표준물질을 이용하여 검량곡선을 작성하고, 미지 시료의 신호를 이 곡선과 비교하여 농도를 결정합니다. 이 방법은 간단하고 빠르며, 많은 시료를 처리할 때 효율적입니다. 그러나 시료 기질의 영향(matrix effect)을 완전히 보정하지 못할 수 있다는 한계가 있습니다. 특히 복잡한 기질을 가진 시료의 경우 정확도가 감소할 수 있으므로, 상황에 따라 다른 정량 방법과 병행하여 사용하는 것이 권장됩니다.
    • 3. 표준물 첨가법(Standard Addition Method)
      표준물 첨가법은 복잡한 시료 기질의 영향을 효과적으로 보정할 수 있는 우수한 정량분석 기법입니다. 시료에 직접 알려진 양의 표준물질을 첨가하여 측정함으로써 기질 효과를 최소화할 수 있습니다. 이 방법은 특히 환경 시료, 생물 시료 등 복잡한 기질을 가진 시료 분석에 매우 유용합니다. 다만 여러 번의 측정이 필요하므로 시간과 비용이 더 소요되며, 선형성 가정이 필요합니다. 정확성과 신뢰성이 높아 중요한 분석에서 선호되는 방법이며, 특히 미량 성분 분석에서 그 가치가 높습니다.
    • 4. 형광 소광(Fluorescence Quenching)과 Stern-Volmer Equation
      형광 소광은 형광 물질의 발광 강도가 감소하는 현상으로, 분석화학에서 중요한 응용 가치를 가집니다. Stern-Volmer Equation은 이러한 소광 현상을 정량적으로 설명하는 기본 식으로, 소광제의 농도와 형광 강도 감소 사이의 선형 관계를 나타냅니다. 이를 통해 소광제의 농도를 정량할 수 있으며, 분자 간 상호작용을 연구할 수 있습니다. 동적 소광과 정적 소광을 구분하여 분석하면 더욱 정확한 정보를 얻을 수 있습니다. 이 방법은 환경 오염물질 검출, 약물-단백질 상호작용 연구 등 다양한 분야에서 활용되고 있으며, 형광분광법의 응용 범위를 크게 확장시키는 중요한 개념입니다.
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