생화학 실험 레포트 - Size exclusion chromatography (Gel filtration) and SDS-PAGE

소개

생화학 실험 수업 레포트로 해당 강의 A+ 받았슴다~
실험 이론이랑 고찰 자세히 적고자 했었어요

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Experimental materials and Methods
Ⅲ. Results
Ⅳ. Discussion
Ⅴ. References

본문내용

Ⅰ. Introduction
- Experimental purpose
단백질을 크기에 따라 분리해주는 Gel filtration의 원리를 알고 실제로 실험을 진행한다. SDS-PAGE를 제조하고, Gel filtration을 통해 얻은 sample과 지난 시간에 만들어 놓은 sample을 전기영동 한다.

- Experimental Theory
⑴ Gel filtration(Size-exclusion chromatography)
Column chromatography의 한 형태로, 주로 단백질이나 핵산 등 생체 내 고분자 화합물의분리에 이용된다. Gel filtration에서는 column에 들어가있는 젤 입자가 정지상으로 작용한다. 젤 입자는 대개 구슬 모양이며 dextran이나 agarose 등의 탄수화물 중합체나 polyacrylamide 중합체로 구성된다. 이러한 gel에는 중합체들의 교차결합된 구조에 의해 미세한 구멍이 만들어져 있다. 따라서 sample을 흘려 넣어주면 작은 분자는 구멍 속으로 들어갈 수 있어 느리게 빠져나오고, 큰 분자는 구멍에 들어갈 수 없어 빠르게 빠져나온다. 이 chromatography 방법은 분자를 크기에 따라 분리할 수 있으며, 알고자 하는 sample을 표준 sample들과 비교함으로써 분자량을 측정하는 데 사용할 수 있다는 장점이 있다.

⑵ SDS-PAGE
- 단백질의 순도, 크기 그리고 대략적인 양을 추정하는 데 일반적으로 이용되는 전기영동법은 계면활성제인 sodium dodecyl sulfate(SDS)를 사용한다. 단백질은 SDS와 결합하여 아미노산 잔기당 거의 1분자의 SDS가 붙게 된다. 단백질에 SDS를 결합시키고 denaturation시키면 단백질의 접혀진 구조가 서로 비슷한 일자형

참고자료

· 곽한식 외. 생화학. (6판). 서울: 라이프사이언스
· 부성희 외. 생화학실험. 서울: 청문각
· Rubisco. 생명과학대사전. 2019년 10월 24일 검색.
· Nelson, David L, Michael M. Cox. (2014). 레닌저 생화학. (윤경식, 역). 서울: 월드사이언 스. Lehninger principles of biochemistry.