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PCR 산물 정제 실험 예비 레포트2025.11.151. PCR 산물 정제 원리 작은 DNA 조각을 정제하는 원리를 이해하고 정제 방법을 숙지하는 것을 목적으로 한다. Column을 이용한 DNA 정제 방법을 사용하여 PCR product를 정제한다. 이 과정에서 Gel & PCR purification system kit을 활용하며, 제조사의 protocol을 따른다. 정제된 DNA는 Agarose Gel 전기영동으로 농도를 확인하고 4℃에서 보관한다. 2. Column을 이용한 DNA 정제 방법 Spin column을 이용한 DNA 정제 과정은 다음과 같다. 정제할 DNA를 포함...2025.11.15
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Column chromatography 예비보고서2025.11.131. Column Chromatography Column chromatography는 혼합물을 분리하는 색채분석 기법으로, 고정상(stationary phase)과 이동상(mobile phase)의 상호작용을 이용합니다. 시료가 컬럼을 통과하면서 각 성분이 고정상과의 친화도 차이에 따라 서로 다른 속도로 이동하여 분리됩니다. 이 방법은 유기화학, 생화학, 분석화학 등 다양한 분야에서 물질 분리 및 정제에 널리 사용됩니다. 2. Stationary Phase와 Mobile Phase Column chromatography에서 고정상(...2025.11.13
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SN2 reaction, TLC, Column chromatography에 관한 유기화학 실험 보고서2025.01.211. SN2 반응 SN2 반응은 chloromethane과 NaOH의 반응을 통해 methanol을 생성하는 화학 반응의 한 예시이다. 이 반응의 반응 속도는 rate=k`[rmCH _{3} Cl]`[OH ^{-} ]로 정의되며, second order 반응속도식을 가진다. SN2 반응은 동시 반응(concerted reaction)으로 Leaving groups의 이탈과 nucleophile의 결합 생성이 동시에 일어나며, chiral center에서 SN2 반응이 일어나면 중심원자의 configuration이 inversion되...2025.01.21
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크로마토그래피를 이용한 색소 분리 및 원리 이해2025.05.011. 크로마토그래피 크로마토그래피는 혼합물을 구성하는 각 성분의 매질에서의 이동속도 차이를 이용해 성분을 분리하는 방법입니다. 고정상(흡착제의 층)의 끝부분에 시료를 흡착시키고 이동상(용매)를 흘려보내면 혼합물 시료의 각 성분은 고정상 내부를 용출과 흡착을 반복하며 이동하게 됩니다. 이 과정에서 흡착이 얼마나 잘 되느냐에 따라 이동속도의 차이가 생겨서 혼합물 시료의 성분 분리가 이루어집니다. 2. 정상 및 역상 크로마토그래피 정상 크로마토그래피는 극성 고정상과 비극성 이동상을 사용하는 방법이며, 역상 크로마토그래피는 비극성 고정상과...2025.05.01
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알켄 메타시스 반응을 이용한 스틸벤 합성2025.11.131. 알켄 메타시스 반응 (Alkene Metathesis Reaction) 메타시스 반응은 두 개의 알킬리덴 기(=CHR)를 교환하는 화학반응으로, 금속 촉매에 의해 촉진된다. 이 실험에서는 스티렌과 그럽스 2세대 촉매를 이용한 교차-메타시스 반응으로 스틸벤을 합성한다. 이 촉매적 접근법은 제품을 최대화하고 폐기물을 최소화하는 장점이 있다. 그럽스 촉매는 산소와 수분에 덜 민감하고 다른 촉매보다 더 많은 작용기를 허용한다. 반응 메커니즘은 가역적이며 촉매를 여러 번 재사용할 수 있다. 2. 컬럼 크로마토그래피 (Column Chr...2025.11.13
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컬럼 크로마토그래피와 회전증발농축기 실험2025.11.161. 컬럼 크로마토그래피(Column Chromatography) 극성 차이를 이용한 분리 방법으로, 정지상(실리카, 알루미나)과 이동상(용매)의 흡착력 차이를 이용하여 혼합물을 분리한다. 컬럼 관에 정지상을 채우고 이동상을 통과시켜 물질의 극성에 따라 다른 속도로 분리된다. 정상 크로마토그래피 특성을 가지며, 극성이 증가할수록 머무름 시간이 길어진다. 실리카는 OH기를 가져 극성이 크고 수소결합이 가능하며, 산성이므로 산에 약한 물질 분리 시 염기성 알루미나를 사용한다. 2. 컬럼 크로마토그래피 실험 절차 Packing 단계에서 ...2025.11.16
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Column Chromatography를 이용한 Ph3P와 4-Phenylazophenol 분리2025.11.121. Column Chromatography (컬럼 크로마토그래피) 컬럼 크로마토그래피는 혼합물을 분리하는 색채분석 기법으로, 고정상(stationary phase)과 이동상(mobile phase)의 상호작용 차이를 이용하여 서로 다른 화합물을 분리한다. 실험에서는 실리카겔을 고정상으로 사용하여 유기화합물들을 효과적으로 분리하며, 용매의 극성을 조절하여 분리 효율을 최적화한다. 2. Ph3P (Triphenylphosphine) 트리페닐포스핀은 유기합성에서 널리 사용되는 인 함유 화합물로, 비극성 특성을 가지고 있다. 컬럼 크로마...2025.11.12
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유기화학실험 - Column chromatography2025.01.181. Column chromatography Column chromatography는 액체와 고체를 분리하거나 정제할 때 가장 유용한 방법 중 하나이다. Mobile phase (eluent)에서 Stationary phase (silica gel)에 대한 흡착력의 차이를 이용하여 물질을 분리하는 방법이다. Eluent를 column에 통과시키면 혼합물에 존재하는 ingredient들이 stationary phase를 따라 움직이는데 각 ingredient와 stationary phase의 사이의 adsorption정도가 달라 co...2025.01.18
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Ion Exchange Column Chromatography2025.01.211. Alkaline Phosphatase (AP) Alkaline Phosphatase (AP)는 인산기(phosphate group)을 떼어내는 기능을 하며, alkaline condition에서 활성을 띠는 특징을 가진다. AP는 E. coli의 outer membrane과 inner membrane 사이의 periplasmic space에 존재한다. 2. Protein Purification AP를 정제하기 위해 osmotic shock, centrifuge, dialysis, heat inactivation 등의 과정을 거...2025.01.21
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DEAE sepharose anion exchange chromatography)2025.01.231. Column chromatography 크로마토그래피는 주어진 시료 중 정량 분석하고자 하는 성분을 분리하고 확인하는 수단으로, 여러 다른 화합물들이 상이한 두 가지 phases 간에 분포되어 있거나 어느 물질 내의 분리 가능한 부위들 사이에 분포되어 있을 때 그 분포된 정도가 화합물들끼리 서로 다르다는 사실에 기초한 방법이다. 한 가지 상은 정지상(stationary phase)이고 다른 상은 이동상(mobile phase)이다. 이동상은 정지상을 일고 있는 물질 위로 흐르는데, 분리될 시료는 이 이동상을 따라 운반된다. 시...2025.01.23
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